王颖，曾含清，肖轶雯，原海燕，刘文辉，罗芝英*，王峰*(1.中南大学湘雅二医院药学部，长沙 410011；2.中南大学临床药理研究所，长沙 410011；.中南大学湘雅三医院药学部，长沙 410015)

    氟康唑是新一代三唑类抗真菌药物，作为新生儿预防和治疗侵袭性真菌感染的一线用药，在临床广泛使用。但是最近有文献报道，常规给药方案会增加真菌定植的风险，并且可能导致新生儿重症监护室(neonatal intensive care unit，NICU)真菌感染率和耐药率上升[1-4]；因此对新生儿氟康唑进行血药浓度监测(TDM)，可以帮助临床判断预防用药时体内浓度及其浓度变化模型，评估氟康唑临床疗效，降低病房真菌感染率和耐药率。

    新生儿与儿童、成人相比，体表面积更大、皮下脂肪组织更薄、血容量更少[5-6]，考虑到患儿血常规、肝肾功能、感染指标测评等需要一定血样量，因此能供血药浓度监测的血样量很少；另外临床主要采用平卧位采血，患儿血容量多集中于躯干及内脏，足末梢的血循环相对较差，以致需要反复挤压或者多次穿刺获得血标本，这样不仅采血量不足，还增加了感染的风险[6-7]。因此建立微量血液的测定方法十分必要。

    血药浓度测定属于临床检验范畴，评估及时性的标准指标为“检验结果回报时间”(turnaround time，TAT)。由于早产儿身体器官发育尚未完善，在肠内营养支持治疗条件下体重容易快速变化，从而导致药物动力学的变化；另外早产儿出生后会长时间住在 NICU，呼吸系统疾病、感染等病情隐匿性强且变化快，而一般血药浓度检测时间为3 h，因此快速的血药浓度报告对于缩短判断周期，即时调整用药方案十分重要。

    近年来，全自动二维高效液相色谱法(automatic 2-dimensional high performance liquid chromatography，2D-HPLC)逐渐应用到血药浓度监测[8-10]，本研究旨在研究氟康唑2D-HPLC 的各种条件，建立高灵敏度方法，降低血液样品体积需求，提高自动化，为早产儿氟康唑个体化用药提供适宜的监测技术，为临床医师用药提供参考。

    1 仪器与试药

    1.1 仪器

    2D-LC-UV 系统由FLC 全自动二维液相色谱耦合仪(湖南德米特仪器有限公司)及岛津LC-20A 液相色谱部件构成，FLC 连接第一维色谱泵、第二维色谱泵、检测器、自动进样器等色谱模块；其中第一维色谱系统(LC1)完成样品富集及一维分离 ......