甘草次酸抑制幽门螺杆菌诱导的Th17炎性反应研究
1材料,1实验动物与细胞,2试药,2方法,1小鼠模型制备与处理,2细胞培养与处理,3ELISA试剂盒法检测炎性因子,4流式细胞术检测,5统计分析,3结果,1甘草次酸对幽门螺杆菌诱导的慢性胃炎小鼠炎性因子水平的影
于卫华,郑倩婧,马翠(空军军医大学第一附属医院消化内镜中心,西安 710032)幽门螺杆菌是一种常见的革兰氏阴性菌,具有很高的感染率[1],其感染主要发生在胃部黏膜中,存活时间较长,且不易根除,是引发人类慢性胃炎的重要病因之一,其中Th17 细胞免疫反应等与幽门螺杆菌感染及病理反应的发生密切相关[2-3]。我国医药人员通过中医药方式治疗幽门螺杆菌诱发的慢性胃炎病症取得了显著效果[4-5],然而由于中药制剂成分复杂,其作用机制并不清楚。
中药甘草对于幽门螺杆菌的抑制和清除效果已有报道,其主要成分甘草次酸是一种已知的三萜类化合物,具有抗炎、抗病毒等多种药理作用[6-7]。本研究拟以幽门螺杆菌感染的慢性胃炎小鼠模型及体外Th17 细胞模型为研究对象,分析甘草次酸对幽门螺杆菌诱发慢性胃炎的作用及机制,为甘草治疗慢性胃炎提供佐证。
1 材料
1.1 实验动物与细胞
SPF 级雄性C57Bl/6 小鼠,4 周龄,体质量19 ~21 g [合格证号:SYXK(陕)2020-004,空军军医大学实验动物中心];RAW 264.7 巨噬细胞由本中心实验室保存;外周血单核细胞分离自正常小鼠。
1.2 试药
甘草次酸(纯度:98%,批号:G0149,Sigma公司);ELISA 试剂盒(Invitrogen 公司);WST-8试剂盒(碧云天生物技术研究所);流式细胞仪(Becton-Dickinson 公司);青霉素/链霉素(批号:15140148)、胎牛血清(FCS,批号:26400044)、RPMI 1640 培养基(批号:C11875500BT)(Gibco公司);anti-CD28 抗体(北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司);anti-CD3 抗体(Abcam 公司);重组鼠BAFF(rBAFF)(Enzo Life Sciences 公司);BAFF 抗体(Adipogen 公司) ......
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