周牡娜，刘检，石雕，刘蓉，邹自征，欧阳方丹*(.益阳医学高等专科学校，湖南 益阳 4000；.湖南中医药大学第一附属医院，长沙 40000；.湖南省直中医医院，湖南 株洲 4000)

    由于恶性肿瘤性质类型各异、累及的组织和器官不同、病期不同以及现在诊断技术的局限，大多数恶性肿瘤患者在确诊时已为中晚期，手术治疗无法实现，因而治疗药物的研发十分必要[1]。目前中医药治疗肿瘤的临床研究正进入循证医学、个体化、规范化的时代，因其有降低毒副作用、减轻症状或延长带瘤生存期等特点得到了广泛认可[2]。顺铂是临床治疗中常用的化疗药物，但顺铂产生的肾毒性、耳毒性、耐药性等在临床上不可避免，近年来以顺铂为核心联合用药的“增效减毒”研究较多[3]，而六味地黄具有改善肾功能、抗氧化、改善免疫功能、消除自由基、抗肿瘤等作用[4]。研究发现六味地黄丸能够对放疗具有增效减毒的作用[5]，同时通过减少诱发肿瘤炎症因子的生成，调节免疫力，增强抗癌基因和抑制原癌基因表达等来发挥抗肿瘤作用[6]。本文通过观察六味地黄提取物及其联合顺铂对人肝癌BEL-7402 一般形态学和细胞迁移的影响，并探讨其对血管新生因子基因表达水平的影响，阐述其抗肿瘤的可能机制，为临床治疗肝癌提供参考依据。

    1 材料

    1.1 六味地黄药材

    六味地黄由熟地黄(玄参科植物地黄干燥块根，益阳三和中药饮片有限公司)24 g，山萸肉(山茱萸科植物山茱萸果肉，三湘中药饮片有限公司)12 g，山药(薯蓣科植物薯蓣干燥根茎，永靛中药饮片有限公司)12 g 及泽泻(泽泻科植物泽泻的干燥块茎，三湘中药饮片有限公司)、牡丹皮(毛茛科植物牡丹干燥根皮，三湘中药饮片有限公司)、茯苓(多孔菌科真菌茯苓干燥菌核，博世康中医药有限公司)各9 g 组成，经湖南省直中医医院药学部主管药师石雕鉴定以上中药饮片均符合用药标准。

    1.2 仪器及试药

    CO2培养箱(美国Thermo 公司)；胎牛血清、胰蛋白酶、1640 培养基(Gibco 公司)；血管内皮生长因子(VEGF)、血管素-2(Ang-2)、血小板反应素(TSP)、金属蛋白酶-2 组织抑制因子(TIMP2)人抗体(武汉博士德公司)；顺铂(齐鲁制药有限公司，规格：10 mg，批号：8C0214B02)。

    1.3 细胞株

    人肝癌BEL-7402 细胞(Procell)。

    2 方法

    2.1 六味地黄提取物的制备

    按“1.1”项下药材量打粉过筛后称取粉末25 g ......