黄芪增益方对小鼠免疫功能的影响
胸腺,脾脏,1材料,1仪器,2试药,3实验动物,2方法,1模型的制备与分组给药,2观察指标及检测方法,3统计学方法,3结果,1对免疫功能低下小鼠的影响,2对正常小鼠单核-巨噬细胞功能的影响,3对小鼠迟发型变态反应的抑制作用,4讨
田俊娜,王婷婷,王双,赵思俊*,朴晋华*,张蕻(.山西中医药大学,山西 晋中 03069;.山西省食品药品检验所,太原 03003)免疫力是人体自身的一种防御机制,是人体识别和消灭外来入侵异物,清除衰老、死亡、病变细胞的能力,对维持生理生命活动具有十分重要的意义[1-3]。免疫力低下会诱导多种疾病的发生,严重影响人们的身体健康[4-5]。黄芪增益方是在六味地黄汤基础上化裁重组,去其“三泄”,取其“三补”,加黄芪[6]和党参[7],强化其增强免疫功能而制成的复方中药。本文通过小鼠腹腔注射环磷酰胺[8]制备免疫低下模型小鼠,评价黄芪增益方对小鼠的免疫功能的保健作用。
1 材料
1.1 仪器
HEMAET 950FS 五分类动物血液分析仪(美国DREM),YJ13B-G 煎药机(北京东华原医疗设备有限公司),ZC/LS-25A 电动耳肿打耳器(上海洛维生物科技有限公司),TU-1901 双光束紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司),涡旋混匀器(德国IKA)。
1.2 试药
黄芪增益方,按黄芪-党参-熟地黄-山茱萸-山药=3∶3∶4∶2∶2 的比例称取中药饮片,加10 倍量水煎煮两次,每次1 h,合并滤液,85 ℃浓缩至1 g(生药)·mL-1,得黄芪增益方水提液。经紫外分光光度计,采用蒽酮-硫酸法,得出方中多糖含量为65.72%。
匹多莫德分散片(北京金城泰尔制药有限公司,批号:190706),注射用环磷酰胺(山西普德药业有限公司,批号:04200501),2,4-二硝基氟苯(DNFB,麦克林,批号:C10654004),印度墨汁(Phygene,批号:20200710),小鼠免疫球蛋白A(lgA)及小鼠白介素4(IL-4)ELASA试剂盒(武汉默沙克生物科技有限公司,批号:202012、202012)。
1.3 实验动物
SPF 级ICR 小鼠,雄性,240 只,体质量18 ~22 g [斯贝福(北京)生物技术有限公司,合格证号110324200101980161],饲养于SPF 级动物室,环境温度控制在20 ~25℃,相对湿度40%~70%,12 h 明暗交替,小鼠可自由摄食饮水。
2 方法
2.1 模型的制备与分组给药
取小鼠90 只,分为6 组,即空白组,模型组,阳性药组,黄芪增益方高、中、低剂量组,每组15 只。空白组与模型组以纯化水10 mL/(kg·d)灌胃;阳性组以匹多莫德分散片0.12 g/(kg·d)灌胃 ......
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