超高效液相色谱-串联质谱法测定东北红豆杉中7种黄酮的含量
槲皮素,乙腈,1材料,1药材,2试药,3仪器,2方法与结果,1色谱-质谱条件,2溶液的制备,3方法学考察,4样品测定,3讨论,1供试品溶液制备条件优化,2色谱条件优化,3总结
彭波,李洪权,柏玉冰*(.湖南中医药大学第一附属医院,长沙 40007;.株洲市食品药品检验所,湖南 株洲4000)东北红豆杉(Taxus cuspidataSieb.et Zucc.)又名紫杉,是红豆杉科红豆杉属植物[1],在我国主要分布于长白山系[2]。成分研究表明东北红豆杉含有紫杉烷、黄酮、甾体、木质素[3]等成分;药理活性研究表明东北红豆杉有抗肿瘤[4-5]、降血糖[6]、抗氧化[7]等药理作用。
目前,关于东北红豆杉的研究大多围绕其紫杉烷类成分的抗肿瘤活性[8-9]。但还有研究表明其黄酮类成分也有很好的生物活性[10-11],如槲皮素[12]、山柰酚[13]和芦丁[14]的抗肿瘤活性,银杏双黄酮对高糖致微血管内皮细胞炎症反应的保护作用[15],金松双黄酮对尿苷二磷酸葡糖醛酸转移酶的抑制作用[16],二氢槲皮素的心脏保护作用[17]以及二氢山柰酚对脂质沉积的抑制作用[18]等。
基于这些黄酮类功效成分对东北红豆杉进行质量评价,对其建立含量测定方法则显得尤为重要。Gai 等[19]测定了金松双黄酮、银杏双黄酮和槲皮素成分的含量。目前尚未发现山柰酚、二氢槲皮素、二氢山柰酚和芦丁4 种成分含量测定的相关报道,更未发现对这7 种成分同时测定的相关报道。
目前中药材中黄酮类成分的含量测定方法有比色法、薄层色谱法、紫外可见分光光度法、高效液相色谱法及液相色谱-串联质谱法等[20]。而鉴于本法测定成分多达7 种,对检测效率和准确性的要求均较高,超高效液相色谱-串联质谱(UHPLC-MS/MS)具有基于质荷比分析而几乎不依赖于各峰之间的分离度(同分异构体除外),分析时间短,灵敏度高等特点[21]。本研究基于UHPLC-MS/MS 法建立东北红豆杉中7 种黄酮成分的含量测定方法,以期为基于黄酮类成分对东北红豆杉进行质量评价提供技术帮助。
1 材料
1.1 药材
东北红豆杉,获取途径为自采、网购和药材市场采购,样品信息见表1。所有批次药材经株洲市食品药品检验所胡冠宇主管药师鉴定均为红豆杉科红豆杉属植物东北红豆杉的带叶枝条或全株。所有批次药材(全株则剪取带叶枝条)均经粉碎后过4 号筛 ......
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