徐双华，吴清(1.北京中医药大学中药学院，北京 102488；2.北京中京丰创科技有限公司，北京 100070)

    骨质疏松症是一种内分泌、营养、免疫、遗传多种复合因素引起的代谢性疾病，大部分患者属于原发性骨质疏松，主要是因年龄增加所致，在老年人、绝经后妇女和恶性肿瘤患者中发生率较高。因此，研究防治骨质疏松的药物极为重要。

    研究表明，肉苁蓉能提高性激素水平[1-2]、促进骨形成[3-5]、抑制骨吸收[6]；菊粉可以增加钙结合蛋白的表达与磷的生物利用度、提高钙吸收与全身骨骼矿物质参数[7-8]；硫酸软骨素能促进成骨细胞增生和新骨形成[9]。本研究将肉苁蓉、菊粉与硫酸软骨素组成复方制剂，研究以去卵巢所致骨质疏松大鼠为对象，观察由上述复方制剂增加动物骨密度及相关蛋白表达的效果，为治疗和预防骨质疏松的作用提供依据。

    1 材料

    肉苁蓉(经北京中医药大学鉴定为肉苁蓉Cistanche deserticolaY.C.Ma)，菊粉(比利时BENEO ORAFTI)，硫酸软骨素钠片(四川省尚善堂制药有限公司)，注射用青霉素钠(华北制药股份有限公司)，戊酸雌二醇(拜耳医药保健有限公司广州分公司)，骨钙素(BGP)试剂盒(上海联硕生物科技有限公司)，碱性磷酸酶(ALP)ELISA 试剂盒(上海联硕生物科技有限公司)，BMP-2 抗体(北京四正柏生物科技有限公司，4AK201716F)，组织蛋白酶K(CK)试剂盒(上海远慕生物科技有限公司)，脱氧吡啶啉(DPD)ELISA 检测试剂盒(上海研域仪器设备有限公司)，白细胞介素-6(IL-6)检测试剂盒、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)检测试剂盒(武汉伊莱瑞特生物科技股份有限公司)，戊巴比妥钠(德国默克公司，批号：20160411)，甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)(上海颖心实验室，批号：TX20149)。NORLAND-Stratec 周围型双能X 线骨密度仪(北京迈尔思瀛海威医疗技术有限公司)；离心机(北京京立离心机有限公司)；电子天平(梅特勒-托利多仪器有限公司)。

    Wistar 大鼠[北京维通利华动物技术有限公司提供，SPF 级健康雌性大鼠，实验单位使用许可证号：SYXK(京)2010-0025]，体质量(300±20)g。所有动物均放置于恒温、清洁的环境中。温度(22±2)℃，相对湿度(65±5)℃，光照12 h，黑暗12 h，动物自由摄食、摄水。

    2 方法

    2.1 肉苁蓉复方颗粒的制备

    肉苁蓉200 g ......