陈宁，黄权华，李婷，李平飞，于红，皮玲琳，杨星钢，杨战鏖*(. 深圳华润九新药业有限公司，广东 深圳 58000；. 沈阳药科大学药学院，沈阳 006)

    近年来，光热治疗(photothermal therapy，PTT)因肿瘤选择性强，不良反应少而被广泛研究[1-3]。PTT作为一种非侵入性的治疗方法，可用于高龄或同时患有其他疾病的患者，提高患者的顺应性[4]；此外，PTT具有不良反应少、高度特异性、不易产生多药耐药性、可重复治疗等优点[5-6]。

    PTT的重点就在于选择合适的光热材料。吲哚菁绿(indocyanine green，ICG)作为近红外有特征吸收峰的有机三碳花菁染料，具有较高的光热转换率[7]，且升温迅速，ICG在激光照射下可迅速升温并杀死肿瘤细胞[8-9]。然而，ICG的临床应用也存在致命的缺陷，其体内半衰期t1/2仅有2～4 min，且极易与血浆白蛋白结合，从体内消除，组织透过性差[10]。在水溶液及生理条件下浓度越高越容易发生自聚集，从而导致荧光猝灭失去光学活性[11-12]。

    为克服上述问题，通常将ICG搭载在载体上，以提高其稳定性，延长血液循环半衰期，提高其肿瘤蓄积率，进一步增加PTT的疗效[13-15]。因此，本实验选择目前应用比较广泛、生物相容性较好的两性聚电解质O-羧甲基壳聚糖(O-CMCS)和聚阳离子载体聚乙烯亚胺(PEI)为载体，采用安全简便的聚电解质法制备ICG纳米粒，可在一定程度上提高其在生理条件下的稳定性，增强组织透过性和肿瘤蓄积，用于肿瘤的PTT。

    1 材料

    1.1 仪器

    Zetasizer Nano粒度测定仪(英国Malvern公司)；JEM1200EX透射电子显微镜(TEM日本电子株式会社)；DF-101S集热式恒温磁力搅拌器(上海凌科实业发展有限责任公司)；UV-8型紫外分光光度计(上海元析仪器有限公司)；808 nm激光器(PSU-H-LED公司)；红外热像仪(Optris公司)；离心机(湖南赫西仪器装备有限公司)；IX71倒置荧光显微镜(美国Olympus公司)；SpectraMax?M3多功能酶标仪[美谷分子仪器(上海)有限公司]；激光扫描共聚焦显微镜(Olympus公司)。

    1.2 试药

    吲哚菁绿(ICG，百灵威科技有限公司)；O-CMCS(武汉大华伟业医药化工有限公司)；PEI(广东翁江化学试剂有限公司)；甲醇(色谱纯，山东禹王化学试剂厂)；Sephadex G50(Pharmacia公司)；RPMI1640培养基(Hyclone公司)；胰蛋白酶(Sigma公司)；胎牛血清(FBS ......