付昆，杨艳，陆一菱，仲蓬，何春杨，徐敏(成都市第三人民医院，西南交通大学附属医院，重庆医科大学附属成都第二临床学院，成都 610031)

    伏九贴敷是本院开展的特色中医外治疗法，由白芥子、甘遂、延胡索、细辛组成，通过药物透皮作用和穴位刺激共同作用防治哮喘等呼吸系统疾病。因该疗法选用带有刺激性的药物，引起局部充血、发泡促进药物的吸收，故而对皮肤刺激性较大。组方中白芥子药物为皮肤刺激性的源头，生白芥子刺激性强于炒白芥子。本课题组前期就此疗法皮肤刺激性与抗哮喘作用相关性进行了研究[1]，发现伏九贴敷药物中生白芥子和炒白芥子的比例各半时，既可维持疗效，又能减轻其对皮肤的副作用。故本研究以该生、炒白芥子配比处方剂量探讨伏九贴敷药物的抗哮喘作用机制。

    1 材料

    1.1 实验动物

    雄性SPF 级SD 大鼠，体质量180 ～220 g[成都达硕实验动物有限公司，动物生产许可证：SCXK(川)2019-189]。于18 ～25℃，12 h 明暗周期交替，适应性饲养5 d，自由饮水、进食。

    1.2 试药

    醋延胡索、醋甘遂、生芥子、炒芥子、细辛均购自四川省中药饮片有限公司，批号分别为200318、190524、200506、191203、200420，由成都市食品药品检验研究院文永盛主任药师鉴定为正品。按芥子∶延胡索∶甘遂∶细辛＝2(生、炒各半)∶1∶1∶1 比例将各药物粉碎为100 目细粉混合，以生姜汁调成糊状制成伏九贴敷药物备用。

    卵蛋白(OVA，货号：A5253，Sigma 公司)，Al(OH)3(批号：20161130，国药集团化学试剂有限公司)，地塞米松磷酸钠注射液(批号：2001202，国药集团容生制药有限公司)，三氯甲烷、异丙醇、无水乙醇(批号分别为10006818、80109218、10009218，国药集团化学试剂有限公司)，苏木素、PAS 试剂盒(武汉谷歌生物)，Trizol(Invitrogen)，HyPure Molecular Biology Grade Water(HyClone)，5×All-In-One RT Master Mix、EvaGreen Express 2×qPCR Master Mix-No Dye(abcam)。

    1.3 仪器

    PL-203 电子天平[梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司]，NE-C801 压缩式雾化器[欧姆龙(大连)有限公司]，JJ-12J 脱水机、JB-P5 包埋机(武汉俊杰电子有限公司) ......