袁美玲，张云，王艳，汪宁*(1.安徽中医药大学药学院，合肥 230012；2.安徽省中药研究与开发重点实验室，合肥 230012；3.安徽省中医科学院中药药效与安全性评价研究所，合肥 230012)

    脑卒中又称中风，是一种急性脑血管疾病，主要包括缺血性卒中和出血性卒中，其中缺血性卒中约占所有卒中发病率的80%以上。缺血性卒中是指脑部血管阻塞或破裂，脑组织血流量减少，致使神经功能受损，引起脑部病变，常见于中老年人群中，具有高致残、高复发、高致死的特点，且近年来发病率逐年提升[1]。目前，组织型纤溶酶原激活剂(tPA)进行溶栓治疗效果显著，但由于治疗时间窗的存在，使得及时进行溶栓治疗受到限制[2]。在现代研究中，缺血性脑损伤涉及的病理机制十分复杂，涉及多种生物活性分子及细胞内信号转导通路，如大量神经细胞程序性死亡、脑组织能量代谢障碍、细胞内钙超载，活性氧大爆发、氧化应激等[3]。因此，抑制神经细胞凋亡、抗氧化应激对于防治缺血性卒中具有重要意义。

    缺血性卒中属于中医“中风”范畴，“脑脉”阻塞，血凝脉内之瘀血是缺血性中风的主要病机之一，故究其本质仍属血瘀证。活血化瘀是血瘀证的特有治法。运用活血化瘀药祛除瘀血、疏通血脉、畅通血流，可改善血液循环、止血和促进血液吸收及改善神经营养等作用；促进血肿吸收和侧支循环建立，减轻及恢复损伤的神经功能，对缺血性中风的治疗有极其重要的意义。中药红花被用于治疗心脑血管疾病100 多年，并且正式列入《中国药典》。羟基红花黄色素A(HSYA)既是中药红花药理功效的最有效水溶性部位，也是红花活血化瘀的有效成分，具有活血化瘀，改善血液循环的功效。已有研究表明，HSYA 的神经保护作用与减轻氧化应激有关[4]。课题组前期研究表明，HSYA 能够透过血脑屏障进入脑脊液中，并且对氧糖剥夺/复糖复氧(OGD/R)损伤的脑微血管内皮细胞具有一定的保护作用[5]。目前公认的模拟体内缺血缺氧模型为对细胞进行OGD/R 处理[6]，因此在缺血性卒中发病机制的研究中多采用HT22 细胞的体外OGD/R 模型，从而为缺血性卒中的治疗提供一定的理论依据。

    1 材料

    1.1 试药

    小鼠海马神经元HT22 细胞(中科院上海细胞生物所)，HSYA(成都德斯特，纯度≥98%，结构式见图1)；LDH 毒性检测试剂盒、超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒、总谷胱甘肽(GSH)试剂盒、丙二醛(MDA)试剂盒(Beyotime)；增强型细胞增殖毒性检测(CCK-8)试剂盒、一氧化氮(NO)试剂盒、活性氧(ROS)(碧云天)；小鼠细胞色素C(CytC)酶联免疫分析试剂盒(江莱生物 ......