翟文姣，张德斌，李红，郭绍芬*，于秀玲，徐勤(1.桂林医学院药学院，广西 桂林 541000；.临沂大学药学院，山东 临沂 76005)

    新型冠状病毒肺炎(COVID-19，简称新冠肺炎)疫情爆发后，国家卫健委与国家中医药管理局中医药推荐使用“清肺排毒汤”来治疗新冠肺炎[1]。临床数据表明，其能降低患者病死率和改善呼吸症状，对新冠肺炎有很好的治疗效果[2-3]。清肺排毒汤包含麻黄、炙甘草、杏仁、生石膏、桂枝、泽泻、猪苓、白术、茯苓、柴胡、黄芩、姜半夏、姜、枳实、陈皮、藿香、射干、细辛、山药、紫菀、冬花等21 味中药材[4-5]，主要由射干麻黄汤、麻杏石甘汤、小柴胡汤以及五苓散等经典名方组成，具有清热解毒、健脾利湿、宣肺平喘的功效[6]。清肺排毒汤的化学成分主要有黄酮类、皂苷类、生物碱类等[1]，该方具有抗病毒、抗炎、解热等多种功能，并且可以通过多成分、多靶点作用于新冠肺炎[3，7]。麻黄具有抗炎、平喘、利尿、兴奋中枢神经等药理作用[8-9]，其主要有效成分为生物碱类[10]。甘草具有抗炎、抗病毒、镇静、抗肿瘤等药理作用[11-12]。黄芩具有抗肿瘤、抗病毒、抗炎、抗氧化等药理作用[13]。

    中药包含多种复杂的化学成分，其治疗效果归因于多种成分的协同作用，因此建立合适的多成分含量测定方法是非常有必要的。

    目前关于清肺排毒汤煎煮工艺的研究鲜有报道，合理的煎煮方法不仅有助于提高汤剂的质量，更是有利于其发挥临床药效[14]。本试验选择响应面法来考察煎煮工艺[15-16]。同时出膏率也可以作为指示中药活性成分的标志[17]。

    因此本试验建立同时测定清肺排毒汤中盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱、甘草苷、黄芩苷、黄芩素含量的高效液相色谱法，并且通过单因素试验与响应面试验从浸泡时长、液料比、煎煮时长等因素优选清肺排毒汤的煎煮工艺。

    1 材料

    1.1 仪器

    Agilent 1260HPLC 色谱仪(安捷伦科技有限公司)；KDM 型电热套(山东鄄城鲁华电热仪器有限公司)；飞鸽牌TDL-80-2B 台式低速离心机(上海安亭科学仪器厂)；科兴HH-4 数显恒温水浴锅(常州市金坛科兴仪器厂)；FA1204 电子分析天平(上海菁海仪器有限公司)。

    1.2 试药

    对照品盐酸麻黄碱(批号：171241-201809)、盐酸伪麻黄碱(批号：171237-201510)(中国食品药品检定研究院，供含量测定用)；对照品甘草苷(批号：AF20071952)、黄芩素(批号：AF8030808)、黄芩苷(批号：AF20021201)(成都埃法生物科技有限公司 ......