常红，袁腾腾，吕淑婕，王雷，2，陈卫东，2，张彩云*，桑冉(.安徽中医药大学药学院，合肥 23002；2.安徽省中药方剂重点实验室，合肥 23002；3.蚌埠医学院第一附属医院，安徽 蚌埠 233099；4.蚌埠医学院，安徽 蚌埠 233030)

    骨质疏松症会导致骨脆性增加并容易发生骨折[1]。目前对于骨质疏松症的治疗主要包括服用抗骨吸收药物，如雌激素、双膦酸盐及降钙素和使用促进骨形成药物，如甲状旁腺激素。但长期服用会对机体产生损害，有研究表明，长期服用雌激素，乳腺癌、子宫内膜癌、心脏病及中风等疾病发生的风险会增加[2-3]。亦有长期服用双磷酸盐导致颌骨坏死等并发症发生的相关报道[4-5]。有些中药具有治疗骨质疏松症的作用，因不良反应少、疗效显著等特点，正逐渐被认可作为治疗骨质疏松症的一种重要的辅助和替代疗法[6]。

    骨疏灵是安徽中医药大学第一附属医院的院内制剂(专利号：ZL200310112848.5)，由淫羊藿、牛膝、黄芪和牡蛎4 味中药组成，临床上主要用于治疗和预防骨质疏松症，疗效确切且无明显不良反应[7-10]。中药成分复杂，指纹图谱具有整体性和模糊性，常作为中药质量评价和控制的分析方法[11-13]。基于此，本研究拟通过超高效液相色谱法(UPLC)建立骨疏灵的指纹图谱，并对其进行相似度评价和聚类分析，同时对指认出的有效成分进行含量测定，从定性和定量两个方面对骨疏灵进行评价，为其质量控制和药效物质基础研究提供参考。

    1 材料

    1.1 仪器

    ACQUITY H-class 超高效液相色谱仪(美国沃特世公司)；Hei-VAP 旋转蒸发仪(德国海道尔夫公司)；SHB-Ⅲ循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司)；JY502 型电子天平(上海浦春计量仪器有限公司)；AB135-S 型十万分之一电子天平(德国梅特勒-托利多公司)；Milli Q-Plus 超纯水系统(美国密理博公司)；WB-2000型数显恒温水浴锅(郑州长城科工贸有限公司)。

    1.2 试药

    色谱级乙腈(批号：SHBM1775，美国默克公司)；色谱级甲醇(批号：21110106G401，瑞典欧普森有限公司)；色谱级甲酸(批号：J2027129，上海阿拉丁生化科技股份有限公司)；超纯水(美国密理博公司)，其他化学试剂均为分析纯。朝藿定A(批号：JOT-10354)、朝藿定B(批号：JOT-10353)(对照品，质量分数≥98%，成都普菲德生物技术有限公司)；毛蕊异黄酮(批号：MUST-18120901)、毛蕊异黄酮-7-O-葡萄糖苷(批号：MUST-19031920)、朝藿定C(批号：MUST-19081310)、蜕皮激素(批号：MUST-18120209)、淫羊藿苷(批号：MUST-18091010)、芒柄花苷(批号：MUST-19041101)(对照品 ......