梁明川，蒙艳丽，王晓溪，王博，徐慧星，王欣，王磊，王伟明(黑龙江省中医药科学院，哈尔滨150036)

    肺炎支原体(mycoplasma pneumoniae，MP)是呼吸道传播和感染中最为常见的一种致病菌，在儿童群体中致病率较高。研究表明，MP感染可以直接造成肺呼吸道黏膜上皮细胞的损伤，是破坏肺组织结构完整，诱发多种肺部系统疾病的主要影响因素。所以修复受损的肺组织在MP感染的治疗中尤为重要。

    表皮生长因子(epidermal growth factor，EGF)在支原体肺炎的治疗和呼吸道黏膜修复中的作用逐渐成为研究的热点。研究显示，EGF于1962年被首次发现。EGF存在于大多数体液分泌物及组织中，尤其在肺脏中EGF表达较高。EGF可以对多种组织的表皮细胞如呼吸道上皮细胞的增殖、分化和修复起重要作用，并能促进肺血管类疾病的发生、发展。实验表明，芩百清肺浓缩丸可通过调控小鼠肺组织中EGF的表达修复受损的肺上皮细胞。

    Biacore分子互作检测实验基于表面等离子共振(surface plasmon resonance，SPR)技术，具有高灵敏度、免标记、实时监测、样品用量少等优点，在生物制药、新药研发等相关领域有着广泛的应用。徐明杭等通过Biacore实验钓取了芩百清肺浓缩丸中与TGF-

    β

    1蛋白结合的亲和活性成分为黄芩苷，并通过亲和力实验进行验证。地龙又名蚯蚓，主要含有蚯蚓素、蚯蚓毒素、花生四烯酸等活性成分。当代研究表明，地龙对MP肺炎有较好的治疗作用。地龙可通过调控TGF与

    α

    -SMA的表达来改善肺纤维化症状。本实验主要通过Biacore系统检测地龙与EGF蛋白体外是否存在有效结合，并应用MP感染动物模型，采用免疫组化(immunohistochemistry，IHC)、Western blot及RT-PCR实验进行体内验证，阐明地龙对小鼠肺组织EGF表达的影响，为地龙治疗MP感染的进一步研究和开发提供科学依据。1 材料

    1.1 实验动物

    60只8周龄BALB/c小鼠，雌雄各半。购自哈尔滨医科大学，饲养于黑龙江省中医药科学院实验动物中心，许可证编号SCXK(黑)2019-001。本研究中的动物实验得到了黑龙江省中医药科学院保护和使用委员会的批准(许可证号：[2011]93)，依照《黑龙江省实验动物护理和使用指南》进行。采用人道主义方式脱颈椎处死实验动物。

    1.2 试药

    地龙药材购买自同仁堂香坊店，并由黑龙江省中医药科学院王伟明研究员鉴定为巨蚓科动物参环毛蚓的干燥完整体；TRIzol试剂(美国Invitrogen ......