李耕，杜薇，严菲，曹玲，陈民辉*(.江苏省食品药品监督检验研究院，南京 009；.广东省妇幼保健院药学部，广州 50000)

    药物相互作用可能发生在药效动力学和药代动力学的各个阶段，约40%的药物是因为体内代谢数据不佳(如诱导或抑制药物代谢酶等)而退出市场。因此，建立一种简单、准确、快速、可靠的方法测定药物代谢酶CYP450 酶活性尤为重要。CYP450 酶系是由多种同工酶组成的超级大家族，主要存在于肝脏中，本研究选用咖啡因、咪达唑仑、右美沙芬、甲苯磺丁脲、奥美拉唑、氯唑沙宗等6 种药物分别作为CYP1A2、CYP3A4、CYP2D6、CYP2C9、CYP2C19、CYP2E1 等6 种同工酶的探针底物，高效液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS)同时检测这6 种探针底物的浓度，通过其消耗量来反映微粒体中CYP450 酶的活性。

    本研究选用吲达帕胺为模型药物，使用已建立的方法考察其对CYP450 酶活性的影响，以期为其临床联合用药提供基础数据。吲达帕胺作为一种抗高血压作用的利尿剂，常与血管紧张素Ⅱ受体阻滞剂、血管紧张素转换酶抑制剂或钙拮抗剂合用治疗高血压，由于其临床联合用药的普遍性，药物相互作用的风险较大，对药物相互作用的研究是保证联合用药安全、有效、合理的基础。笔者查阅了吲达帕胺代谢相关的文献，Sun 等报道了吲达帕胺代谢转化的路径，证明了吲达帕胺的主要代谢器官为肝脏，主要代谢酶为CYP3A4，其次是CYP2C19 和CYP2C8。Wang 等从基因多态性角度研究了人群中吲达帕胺代谢的差异性，发现了另一可能参与代谢的酶亚型为CYP2C9。Yan 等研究了7 种抗高血压药在体外肝微粒体孵育时对吲达帕胺生物转化的影响；但这些研究均为CYP450 酶对吲达帕胺代谢的作用和影响，均未涉及吲达帕胺对CYP450 酶活性(诱导或抑制)的影响。因此，本研究初步筛查了吲达帕胺对CYP450 酶亚型的影响，以期为联合用药时吲达帕胺对其他合用药物的潜在影响进行预测和评估。

    1 仪器与材料

    1.1 仪器

    Finnigan TSQ Quantum Discovery MAX 液质联用系统(美国Thermo 公司)；Eppendorf 5430R 高速冷冻离心机(德国Eppendorf 公司)；-80℃超低温冰箱(美国Thermo 公司)；XW-80A 旋涡混合器(上海医科大学仪器厂)；HH-2 数显恒温水浴锅(常州国华电器有限公司)。

    1.2 试药

    甲苯磺丁脲(批号：100500-200801)、氯唑沙宗(批号：100364-201302)、咖啡因(批号：171215-201009)(对照品 ......