巴西海木提取物抗生殖系统氧化损伤活性研究
存活率,睾丸,1材料,1仪器,2试药,3细胞培养,4实验动物,2方法与结果,1巴西海木提取物的制备20-21,2巴西海木提取物对TM4细胞增殖率的影响,3过氧化氢损伤条件的确定22,4巴西海木提取物对氧化损伤TM4细胞
常馨月,米晓,董明然,王同瑾,胡美赓,沈俊宇,路娟*,陈曦*(.中国医学科学院 北京协和医学院 药用植物研究所,北京 0093;.FITOTERAPIA BIOTECH LTDA公司,巴西 0040-000)多项研究强调了诱发精子质量下降和睾丸功能损伤的因素,其中环境诱因和生活方式对男性生殖健康产生了较大影响[1-3]。邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)是应用最广泛的增塑剂之一,可通过饮水、饮食、皮肤接触(化妆品)和呼吸进入人体,具有雌激素样作用,影响生物体内激素的正常分泌,对人体健康造成不同程度的危害[4-5]。
楝科植物巴西海木(Trichilia catiguaA.Juss.)是主产于南美洲的一种小型灌木,作为巴西传统药物常用于缓解疲劳、压力和壮阳。以巴西海木为原料的保健品“Catuama”在巴西商业化应用已有20余年的历史[6]。现代药理研究表明巴西海木具有显著的抗炎、抗菌[7-9]及抗氧化作用[10-14]:巴西海木的乙酸乙酯组分可有效抑制鱼藤酮引发的神经细胞SH-SY5Y氧化损伤;抑制缺血再灌注引起的氧化损伤等,且在健康的人类志愿者中没有出现毒副作用[15]。研究表明,巴西海木树皮的醇提物中含有绿原酸、原花青素B2、花青素C1、表儿茶素、儿茶素、黄烷-3醇、β-谷甾醇、豆甾醇和莰烯醇等化合物[16-18],其中黄酮类化合物和酚类也被认为是其抗氧化活性的基础[19]。巴西海木在民间医学中广泛用于治疗阳痿等生殖系统疾病,而目前现代药理学研究主要集中在神经系统的抗氧化作用,生殖系统相关作用及机制报道较少,故本研究以生殖系统为切入点进行研究。本研究利用H2O2致TM4细胞氧化损伤模型初步筛选出巴西海木对于细胞氧化损伤具有保护作用的提取物;建立DEHP致雄性小鼠生殖系统氧化损伤模型,进一步对筛选出的提取物进行药效评价;通过qRT-PCR研究相关基因的表达情况,初步探究其生殖系统保护作用机制,为巴西海木的开发利用提供依据。
1 材料
1.1 仪器
AB265-S 电子分析天平(瑞士 METTLER TOLEDO公司),Infinite M1000 多功能连续波长酶标仪(瑞士 TECAN公司),B25-12DT 型超声波清洗器(宁波新芝生物科技股份有限公司),SC-3610 低速离心机(安徽中科中佳科学仪器有限公司),MCO-15AC二氧化碳培养箱(三洋电机株式会社),IX51 型荧光倒置显微镜(日本OLYMPUS公司),NanoDrop 2000 分光光度计(美国Thermo Fisher Scientific公司) ......
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