王绍展，王媛媛，顾妍秋，陈春，李胜男，王蓉，原永芳(上海交通大学医学院附属第九人民医院药剂科，上海 201999)

    肝纤维化是各种慢性刺激或病因所致肝组织中细胞外基质(ECM)的过度增生和沉积，是一种可逆性的肝损伤修复反应，继续发展可导致肝硬化甚至肝癌。大量研究表明，肝星状细胞的活化是肝纤维化发生的中心环节[1-2]，在促纤维化因子作用下，激活的肝星状细胞急剧增殖并分泌大量ECM，胶原纤维的合成和分解失衡，导致肝组织ECM 过度沉积。目前尚无美国食品药品监督管理局(FDA)批准的特效的抗肝纤维化的化学或生物药物进入临床应用。槲皮素是一种黄酮类化合物(结构式见图1)，广泛存在于蔬菜、水果、茶等植物的花、叶、果实中，具有抗氧化、抗炎、免疫调节、抑制新生血管生成等作用[3]。研究证实槲皮素对多种实验性肝纤维化模型具有很好的保护作用[4-7]，对其抗肝纤维化作用机制NF-κB/IκBα、Wnt 等信号传导通路方面进行了有益的探讨[4-8]，但仍然不够全面。研究发现TGF-β介导的TGF-β/Smad 通路和非Smad依赖通路(如TGF-β/TAK1/JNK 信号传导通路)在肝星状细胞的活化、增殖以及胶原合成的过程中发挥了非常重要的调控作用[9-12]。为探讨槲皮素抗纤维化的作用机制与TGF-β/TAK1/JNK 和TGF-β/Smad2 信号通路之间的关联，本研究构建了二甲基亚硝胺(DMN)诱导大鼠肝纤维化模型和TGF-β诱导HSC-T6 细胞活化模型，从体内和体外两个方面，着重考察槲皮素对TGF-β/TAK1/JNK 和TGF-β/Smad2 信号通路的影响。

    图1 槲皮素的结构式Fig 1 Chemical structure of quercetin

    1 材料

    槲皮素(CAS：117-39-5，上海诗丹德生物技术有限公司，纯度≥98%)，DMN(Sigma)，TAK1、Phospho-TAK1、JNK、Phospho-SAPK/JNK(美国Cell signaling Technology)，Smad2、Phospho-Smad2 单克隆抗体、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)(美国Santa Cruz Biotechnology)，转化生长因子β1(TGF-β1)(美国R&D Systems)，免疫组化试剂盒(武汉博士德生物工程有限公司) ......