基于网络药理学的山豆根保肝作用药效物质筛选及实验验证
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秦妍,包永睿,2,王帅,2,李天娇,2,张秀君,孟宪生,2*(. 辽宁中医药大学药学院,辽宁 大连6600;2. 辽宁省中药多维分析专业创新技术中心,辽宁省现代中药研究工程实验室,辽宁 大连 6600;. 丹东药业集团有限公司,辽宁 丹东 80)肝病一直以来都是全球面临的公共问题和社会问题,包括脂肪性肝病、药物性肝病、自身免疫性肝病、病毒性肝炎、肝硬化、肝癌等[1]。目前,世界卫生组织统计数据表明[2],全球约有2.4亿慢性乙肝病毒携带者和1.5 亿慢性丙肝病毒感染者。其中,慢性乙型肝炎患者中有10%~20%进展为肝硬化;2020年,全球肝癌发病人数高达90.5677 万人,因肝癌死亡人数为83.0180 万人。肝病发病原因众多,氧化应激毒性、胆汁酸异常代谢、噬肝性病毒、miRNA 调控可能是造成肝脏疾病主要危险因素[3]。除此之外,酒精、肥胖、遗传因素、饮食状况等也与肝病的发生发展有关。目前,临床上治疗肝病的抗病毒药物层出不穷,其机制主要为抑制病毒的复制。但对于肝硬化、原发性肝癌患者,更多的治疗手段也难以控制疾病的进程,因此迫切需要寻找毒副作用低、安全有效的治疗药物。
山豆根为豆科植物越南槐Sophora tonkinensisGagnep.的干燥根和根茎,始载于《开宝本草》,《植物名实图考》中记载,山豆根解毒功热甚效,与临床消热解毒的效用一致[4]。山豆根具有多种不同生物活性成分,包括生物碱类、黄酮类、多糖类、酶、核苷酸和微生物等。山豆根具有广泛的药理作用,如抗肿瘤、保肝、抗病毒、抗氧化、免疫调节、抗炎、改善心血管系统等[5-9]。体内外试验研究表明,山豆根及其主要活性成分在治疗肝癌、抑制新生血管生成、保护肝损伤方面发挥着重要作用。本实验采用微流控芯片技术始终保持给药持续性,更加接近人体真实环境。静态培养易出现药物蓄积等情况,而微流控芯片采用低剪切力灌注不会因药物蓄积而影响药物释放,因而也避免了因侵袭作用结果不准确的问题。酶联免疫吸附法将抗原抗体亲和反应的高度特异性与酶催化反应的放大作用相结合,在本实验中通过颜色反应来进行定量分析,操作简单方便、灵敏度高、检测结果相对可靠。
本实验室前期研究发现,从山豆根中提取的山豆根生物碱能不同程度地减少肝组织中VEGF、PI3K mRNA 的表达,增加PTEN mRNA 的表达,其作用机制与环磷酰胺相似[10]。然而由于山豆根活性成分的多样和结构复杂,难以获得山豆根保肝作用的药效物质基础。因此本研究首先通过中药网络药理学,预测山豆根抗肝炎、肝硬化、肝癌的潜在药效物质。进一步采用微流控芯片技术进行验证 ......
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