基于P物质和P-糖蛋白探讨黄芪多糖温敏凝胶改善小鼠放射性皮炎的机制
1材料,1仪器,2试药,3动物,2方法,1APS温敏凝胶的制备,2小鼠放射性皮炎模型的制备10-11,3RT-PCR法测定皮肤中SP和炎症因子的mRNA,4Westernblot法测定皮肤中P
张国荣,张建萍,马小花,周燕,武新安(兰州大学第一医院药剂科,兰州 730000)黄芪为豆科植物蒙古黄芪Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge. var.mongholicus(Bge.)Hsiao或膜荚黄芪Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.的干燥根,具有补气升阳、固表止汗、敛疮生肌等功效[1]。黄芪多糖(Astragalus polysaccharides,APS)是黄芪中含量最多的一类物质,是由葡萄糖、果糖、木糖、核糖、阿拉伯糖、半乳糖、甘露糖和鼠李糖组成的酸性多糖[2-3]。现代药理学研究发现APS 具有抗感染、抗氧化、抗自由基和免疫调节等药理作用,临床广泛应用于皮肤创伤、疱疹病毒感染、疮疡、过敏性皮肤病和烫伤等[4-6]。
放疗是利用放射线治疗肿瘤的一种局部方法,是目前治疗恶性肿瘤的重要手段之一,约70%肿瘤患者需要接受放疗。然而,95%的放疗患者在放疗后均会出现不同形式的放射性皮炎[7],部分患者甚至因出现3 级和4 级放射性皮炎,而不得不进行伤口处理,甚至中断放疗。因此,缓解或减慢放射性皮炎进展对于确保放疗顺利进行具有重要的意义。研究表明放射性皮炎与DNA 破坏,氧化应激和免疫破坏等有关[7-8]。P物质(substance P,SP)是参与皮肤局部免疫炎症反应和促进创面修复的重要介质。P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)是分布于细胞膜上的外排转运体,可促进毒性物质的排出。免疫组化研究显示P-gp 在表皮、表皮角质形成细胞或真皮成纤维细胞中的表达较弱,而在人皮肤汗管、血管、神经鞘和肌肉中有明显表达,其可将表皮细胞吸收的毒性物质及代谢废物及时分泌到血流和汗管中,促进皮肤微环境的改善[9]。为此,本研究基于SP 和P-gp 探讨APS 温敏凝胶对小鼠放射性皮炎的作用及其机制。
1 材料
1.1 仪器
Western blot 电泳仪(DYCZ-24DN)、 湿转仪(DYCZ-40D)和水平脱色摇床(WD-9405B)(北京六一仪器厂);Unique 型直线加速器(美国VARIAN 医疗设备有限公司);罗氏实时荧光定量PCR 仪(480/480 Ⅱ)(瑞士罗氏公司);GBS 光学显微镜(德国GBS 公司)。
1.2 试药
APS (西安明泽生物科技有限公司 ......
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