程红，田锐(.华中科技大学分析测试中心，武汉 430074；.华中科技大学同济医学院附属同济医院，武汉 430030)

    胶原蛋白是哺乳动物体内最丰富的蛋白质，是细胞外基质中的主要结构蛋白，广泛存在于皮肤、骨骼、肌腱、韧带和其他结缔组织中，主要用于止血海绵、软组织增强注射物、细胞产品基质以及药物输送的载体。其中，胶原蛋白海绵具有吸收组织渗出物、透气性好、促进上皮细胞生长和肉芽组织生成等优良特性，可应用于止血和创面愈合。手术创伤引起不同程度的出血和渗血直接影响手术的治疗效果。手术中采用物理、机械或化学的止血方法均存在一定的局限性和不良反应，而胶原蛋白类的止血敷料则是一种有益的补充，如在胆囊切除手术、T 管引流手术、阑尾切除手术、胃大部切除手术、肝叶切除手术、胰十二指肠切除术、左半或右半结肠切除手术(切除后端-端吻合)、脾脏切除等相关手术中均能获得稳定而满意的止血效果。在大多数的手术操作中，在切除的断端或出血的局部，应用1 ～2 片胶原蛋白海绵短暂压迫即可达到止血的目的。

    胶原蛋白和胶原蛋白海绵的共同特点是三螺旋结构：三条

    α

    多肽链形成超螺旋构象，出现频率最高的氨基酸序列是-Gly-Y-Z，其中甘氨酸(Gly)代表每隔两个氨基酸就出现的重复残基，Y 和Z 是脯氨酸(Pro)和羟脯氨酸(Pro-OH)。由三条相同大小的多肽链组成的三螺旋结构是胶原的基本结构单元，其分子量约为285 kDa。使用质谱直接测定天然胶原蛋白的分子量仍然具有挑战性，电喷雾电离质谱适合分析相对分子质量在20 万以下的极性化合物，对于胶原蛋白来说，通常是在一定转变温度内，当三螺旋结构由三股胶原转变为单链时测定。使用热裂解气质联用仪(Py-GCMS)测试胶原蛋白可以通过裂解产物分析天然蛋白的分子结构，为分析蛋白质中的氨基酸组成提供了另一种思路。同时，新一代商用拉曼仪器促进了拉曼(Raman)光谱在生物科技和食品工业中的诸多应用，Raman 光谱已成为蛋白质科学的一种通用工具。圆二色(CD)光谱则可以分析胶原蛋白的三螺旋构象是否得以保留。目前，胶原蛋白海绵应用最广泛的灭菌方法是

    γ

    -射线辐照。该方法被认为是最简单和有效的灭菌方法，不会产生有毒物质，不会破坏化学键，不会降低拉伸强度和模量，从而不会从根本上影响到被辐照的材料。但是

    γ

    -射线辐照对于胶原蛋白三螺旋结构的影响尚不明确。本文使用Py-GCMS 对灭菌前后的胶原蛋白海绵的三螺旋结构进行测试，研究其辐照前后的结构变化，并使用Raman 光谱观察辐照对胶原蛋白海绵三螺旋结构的影响 ......