健脾消癌方的HPLC-Q-TOF/mF指纹图谱分析及多指标含量测定
甘草酸,橙皮,黄芩,1材料,2方法与结果,1健脾消癌方冻干粉的制备,2溶液的制备,3方法学考察,4指纹图谱的建立,5健脾消癌方LC-MS分析,6多指标成分的含量测定,3讨论
王容容,柏正平,杨静,王其美,陈林,卢林竹,蒋益兰*(.湖南省中医药研究院附属医院,长沙 40006;2.湖南省中医药研究院中药研究所,长沙 400;.湖南中医药大学,长沙 40028)健脾消癌方是湖南省名中医蒋益兰教授防治大肠癌的经验方。全方由人参、白术、枳实、蛇舌草、半枝莲、重楼、甘草等13味药物组成。方中人参为君,合白术、茯苓、甘草为四君子汤益气健脾,以健生化之源,而疗诸虚不足,从而达到扶正固本的目的;黄芪甘温,益气补虚健脾为臣;枳实、郁金行气除痞,白花蛇舌草、半枝莲、重楼、藤梨根清热解毒、消痈散结,法半夏燥湿化痰,薏苡仁健脾渗湿,以上共用之为佐;甘草调和诸药为使。全方药物配伍精要,攻补兼施,共奏益气健脾、化瘀解毒之功,顺应了大肠癌患者“虚、瘀、毒”并存的病机特点。全方扶正祛邪,标本同治,在大肠癌和大肠癌术后巩固治疗中取得满意的临床疗效。临床研究表明,本方能降低大肠癌患者术后复发转移率,提高生存质量,延长生存期。动物实验研究结果表明,健脾消癌方能有效延长大肠癌裸鼠生存期,降低裸鼠肝转移率,降低肝组织血管内皮生长因子(VEGF)和血管内皮生长因子受体(VEGFR-2)蛋白表达;可通过调节基质金属蛋白酶(MMP)-9、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)、VEGF等因子影响血管生成;可通过调控TGF-
β
非Smad信号通路PTEN-PI3K/AKt信号通路抑制肿瘤血管形成,从而降低结肠癌裸鼠模型转移率,提高裸鼠体质量,抑制瘤体生长等;并可通过逆转转化生长因子-
β
(TGF-
β)诱导的上皮-间质转化(EMT)过程防治大肠癌转移。中药复方由多味药物配伍而成,其有效成分多,具有多成分、多靶点、多途径的作用特点。对中药复方中多成分及其含量进行分析鉴定是中药复方现代化质量控制的重要手段和趋势。鉴于健脾消癌方防治大肠癌疗效确切,有必要对其进行全面的质量控制研究。本实验拟对健脾消癌方的指纹图谱和多组分含量测定进行研究,以全面控制该复方的质量,通过建立健脾消癌方的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,并进一步采用高效液相色谱串联飞行时间质谱对其主要化学成分进行结构鉴定,对其指标成分进行定量分析,以期为健脾消癌方制剂的研发和质量控制奠定基础。1 材料
1290高效液相串联四极杆飞行时间质谱6530、Agilent 1200高效液相色谱仪(安捷伦科技有限公司),XPE105型析天平(精度:0.01 mg)、AL204型万分之一电子天平、XPE105型十万分之一电子天平(梅特勒-托利多仪器有限公司) ......
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