田志鹏，杜曦*，王亮，兰舫，张灿(.河北常山生化药业股份有限公司，石家庄 050800；2.河北省多糖类药物工程技术研究中心，石家庄 050800)

    肝素钠，作为一种抗凝血、抗血栓的药物已存在百年之久，其中低分子肝素作为抗凝血剂，是最常用于血栓栓塞的预防和治疗药物。2020年世界卫生组织在“疑似新型冠状病毒感染时针对严重急性呼吸道感染的临床处理临时指导”中曾建议，可通过给予肝素以预防新型冠状病毒肺炎患者的静脉血栓栓塞。2022年最新的研究表明使用高于预防剂量的依诺肝素治疗新型冠状病毒肺炎患者，可将其住院时间缩短20%以上，缓解超过65%病例的症状。

    肝素的粗品通常来源于猪肠黏膜(牛源和羊源肝素与猪源肝素同样有着类似的理化性质和结构)。肝素粗品经过盐解，热变性，提纯，氧化得到肝素钠精品。肝素平均分子量约16 000道尔顿(Da)，并且有相似的抗Ⅹa与抗Ⅱa因子活性。低分子量肝素(LMWH)重均分子量通常在8000以下，小于8000的级分不少于60%，且抗Ⅹa因子大于抗Ⅱa因子活性。两者皆通过结合ATⅢ抑制凝血酶的活性，达到抗凝血、抗血栓的作用。

    目前对于肝素类原料产品的保存方式仅限于固体干燥粉末，且需要密封置于阴凉，干燥处存放。而将肝素钠、达肝素钠、依诺肝素钠以溶液状态存放，存在染菌风险，随着时间的延长，产品会有一个自然分解过程，重均分子量逐渐变低，低分子组分逐渐增多。本文用到的肝素钠及两种代表性低分子量肝素产品(达肝素钠、依诺肝素钠)均为我公司自制。达肝素钠为亚硝酸降解法制备，依诺肝素钠为

    β

    -消除降解法制备。通过将多糖类肝素产品从其溶液中分离，加乙醇进行液封保存，并将此法长期保存的样品与干燥粉末的分子量、效价、双糖进行对比，考察肝素产品的质量变化，以提供一种新的保存方式和可存放的时限，解决企业生产过程中遇到的产品因滞留和冻干设备故障中间产品无法保存的问题。1 材料

    1.1 试药

    肝素钠、达肝素钠、依诺肝素钠(原料药，河北常山生化药业股份有限公司)；依诺肝素钠对照品(批号：6.0，欧洲药品质量管理局EDQM)；氯化钠(河北华晨药业)；乙醇(梅河口市阜康酒精有限公司)；醋酸铵、亚硝酸钠、三羟甲基氨基甲烷、硫酸、氢氧化钾(分析纯，天津永大化学试剂有限公司)；乙二胺四乙酸二钠、硫酸钠、磷酸二氢钾、醋酸钙(分析纯)、牛血清白蛋白(含量≥98%，Vetec Sigma-Aldrich)；硝酸锂(分析纯，Aladdin试剂)；抗凝血酶ATⅢ、FⅩa因子、发色底物S-2765 ......