张潇莉，杨娜，葛佳佳，朱怀军，何骏，葛卫红，*(.南京中医药大学中西医结合鼓楼临床医学院，南京 0008；.南京大学医学院附属鼓楼医院药学部，南京 0008)

    类固醇激素是一类由胆固醇经一系列酶催化代谢产生的脂溶性小分子化合物，主要包括性激素和皮质激素。内源性类固醇激素的变化在内分泌疾病及相关代谢性疾病的筛查与诊断中具有重要参考价值，其精确定量分析对于临床研究是十分必要的。目前，临床常用检测类固醇激素的方法主要是免疫分析法，但随着液相色谱串联质谱(liquid chromatography tandem mass spectrometry，LC-MS/MS)技术的不断发展，其因高通量、高灵敏度和高特异性，适用范围广、检测周期短，并且具有同时定性定量分析多种激素的优势，已逐渐替代免疫分析方法，成为临床检测与疾病筛查及诊断中重要的新技术。

    与血清、血浆样本相比，尿液样本可以被非侵入性地连续收集，患者更易接受，且尿液前处理相对简单。尿液排泄作为人体排泄的重要途径，尿液中涵盖大量内源性极性代谢产物。通过对尿液样本进行定量，可提供一个较为完整的代谢概况。例如，24 h尿儿茶酚胺的结果可比血儿茶酚胺更加精准地反映交感神经和肾上腺髓质的功能。临床诊断库欣综合征时，24 h尿游离皮质醇能够避免皮质醇的瞬时变化，避免血中皮质醇结合球蛋白浓度改变而影响皮质醇测定结果，且在大剂量地塞米松抑制试验中24 h尿游离皮质醇对库欣综合征诊断的灵敏度和特异性都高于血皮质醇。5-羟吲哚乙酸的定量检测可用于神经内分泌肿瘤患者的监测和诊断，虽然其可以在血样中被定量分析，但临床通常采用尿液样本进行检测。因此，利用LC-MS/MS技术检测尿液样本中的内源性物质具有一定优势，且已成为临床检测的一个重要方向。本文主要就LC-MS/MS技术在尿液类固醇激素测定中的研究及临床应用进行综述。

    1 基于LC-MS/MS技术的尿液类固醇激素定量方法的研究现状

    LC-MS/MS技术是一种结合液相色谱与质谱的定性和定量的分析技术。该技术具有液相色谱的高效分离性能和串联质谱的高灵敏度、高特异性检测的特点，可实现多种成分的同时测定，适用于血清、尿液等复杂生物样本的分析检测。目前，利用LC-MS/MS技术在尿液中检测内源性类固醇激素正在迅速发展，其前处理不断优化，灵敏度不断提高，检测数量也逐渐增多。

    尿液中涵盖大量的内源性极性代谢产物，在分析检测前通常需要进行前处理以去除干扰性小分子。常用的前处理方法主要有蛋白质沉淀法、液液萃取法和固相萃取法，但上述方法均存在操作时间长 ......