周碧兰，彭电，曾慧，李海刚(.长沙卫生职业学院药学院，长沙 40600；.长沙医学院新型药物制剂研发湖南省重点实验室，长沙 409)

    糖尿病是一种由胰岛素分泌或作用缺陷所引起的以高血糖为重要特征的慢性疾病，主要分为1型和2型[1]。近年来，糖尿病患病率逐年增加，并呈现年轻化的趋势，国际糖尿病联合会统计的数据显示2017年全球大约有4.15亿糖尿病患者，2045年将超过6.29亿[2-4]。糖尿病患者由于糖代谢紊乱易导致糖尿病肾病、视网膜病变、糖尿病足等一系列并发症的发生，严重影响患者生存率[5-7]。

    研究证实，糖尿病患者体内的胰岛β细胞数量的减少是导致其胰岛功能受损的重要原因，其与β细胞内发生的内质网应激反应密切相关[8]。内质网是蛋白质合成和加工的重要细胞器，当合成新蛋白质的需求与内质网促进蛋白质成熟和转运的能力失去平衡之后，易导致内质网应激的发生，而在胰岛β细胞中，存在着高度发达的内质网系统[9]，尤其是在2型糖尿病患者体内的胰岛β细胞中，由于发生胰岛素抵抗，机体内代偿性胰岛素分泌增多，增加了内质网的负担，并且存在高游离脂肪酸和高糖的刺激，从而诱导了β细胞发生内质网应激反应甚至凋亡[10]，因此，严重的内质网应激是加剧糖尿病胰岛损伤的一个重要机制，积极研发具有减轻胰岛β细胞内质网应激进而减轻胰岛损伤作用的新型控糖药物，对于改善糖尿病患者的生活质量具有十分重要的意义，也能为糖尿病患者提供更多的用药选择。

    1-脱氧野尻霉素(1-deoxynojirimycin，DNJ)是一种多羟基生物碱成分，存在于桑叶、鸭跖草、风信子和沙参属等植物中，也可从微生物链霉菌和芽孢杆菌中分离得到[11-12]。近年来，多项研究结果表明DNJ具有抑制糖代谢紊乱的作用[13-15]，但DNJ在糖尿病模型鼠中是否能降低血糖水平、减轻胰岛组织损伤并改善胰岛素抵抗值得我们探究，由于内质网应激可诱导胰岛细胞损伤后进一步引起糖尿病恶化，本研究将进一步探讨DNJ对糖尿病的作用是否与调控内质网应激反应及其下游通路蛋白水平有关。

    1 材料

    1.1 实验动物

    实验动物C57BL/6小鼠，雄性，鼠龄5～6周，40只，体质量(18±4)g [南京大学模式动物研究所]。小鼠购入后在动物房适应性喂养1周，严格遵守动物管理条例，按照标准条件饲养[动物房温度(25±3)℃；相对湿度50%～65%]。昼夜节律照明，并给予小鼠自由饮水和适量的饲料。

    1.2 试药与仪器

    DNJ、链脲佐菌素(STZ)、4%多聚甲醛固定液和胰岛素ELISA检测试剂盒(美国Sigma公司)；盐酸二甲双胍片(浙江亚太药业股份有限公司)；血糖仪和血糖试纸(美国强生公司)；β-actin、p-PERK、p-eIF2α、IRE1α、p-JNK等抗体和HRP标记的二抗(美国Cell Signaling Technology公司)；胰岛素注射液(江苏万邦生化医药股份有限公司)；葡萄糖(阿拉丁试剂有限公司)；水合氯醛(上海尚宝生物科技有限公司)；HE(苏木精-伊红)染色试剂盒(武汉赛维尔生物科技有限公司)；高脂饲料(南通特洛菲饲料科技有限公司 ......