旷敏，彭伟伟，许立，郑雨婷，桑子焕，秦思雨，邹振兴*(1.中南大学湘雅药学院，长沙 410013；2.慢病诊疗小分子药物发现与转化湖南省重点实验室，长沙 410013)

    微生物代谢是发现天然活性产物的一大重要途径，目前为止，从微生物天然产物中分离出的具有生物活性的化合物有1 万多种[1-2]。其中，植物根际土壤真菌因其强大的次生代谢能力、潜在的物种多样性及便于发酵和遗传等优势，逐渐成为继植物内生真菌之后研究者们关注的焦点。植物根际土壤真菌是指生存于植物根系活动区域的真菌，它们同植物根系紧密联系，又广泛参与土壤生态中营养物质的循环，其代谢途径独特，能够产生结构新颖、生物活性显著的次生代谢产物[3]。据统计，植物根际土壤真菌目前研究偏重于农业应用，其化学成分研究存在较大的探索空间[4-5]。

    木霉属真菌是普遍存在于土壤中的一种常见植物根际微生物。在自然界中，木霉属真菌多通过化学途径帮助植物抵抗虫害，具有强大的代谢能力。目前，木霉属真菌已被发现数百种次生代谢产物，主要包括萜类、环肽类、二酮哌嗪类、生物碱类及聚酮类化合物，且大多具有较好的抗肿瘤、抗菌等药理活性[6-7]。现有研究表明，木霉属真菌能产生众多结构独特的活性分子，具有极大的挖掘价值。本研究前期从药用植物根际土壤样本中分离筛选出一株木霉属真菌Trichoderma velutinum，化学丰度筛选显示其代谢产物丰富，且经文献调研发现Trichoderma velutinum的次级代谢产物成分研究稀少，因此，有必要对其化学成分进行深入探索。将其进行大规模固体发酵并用乙酸乙酯冷浸提取发酵产物，利用各色谱层析手段进一步分离纯化获得13 个化合物，其中包括4 个细胞松弛素、6 个二酮哌嗪、1 个N-acetyltryptamine 和2 个腺苷类化合物。化学结构如图1 所示。

    图1 化合物1 ～13 的结构Fig 1 Structures of compounds 1 ～13

    1 材料

    Agilent 1290 型高效液相色谱-Agilent 6500 series Q-TOF 质谱联用仪(美国安捷伦公司)；Bruker AV-400/AV-500/AV-600 型核磁共振仪(德国Bruker 公司)；Autopol IV-T 全自动旋光仪(美国鲁道夫公司)；X-6 熔点测定仪(北京泰克仪器有限公司) ......