杨建婷，梁引库，王全华*(.兵器工业五二一医院药剂科，西安 70065；.陕西理工大学生物科学与工程学院，陕西 汉中 73000)

    临床上真菌感染性疾病不断增多，白念珠菌(又称白假丝酵母菌)是最常见的一种条件致病性真菌病原体，定植于人体的各个部位，其生长主要受宿主免疫力、压力、微生物菌落和其他因素的影响[1]。随着真菌耐药性不断升高且日益严重，开发新型抗白念珠菌的植物药成为近些年来的研究热点[2]。我国科学家经过几十年的探索，发现许多中草药具有抗真菌作用，对白念珠菌有抑制作用的中药有决明子、苦参、黄芩、乌梅等[3]。中草药活性成分抗白念珠菌的作用机制是通过破坏菌体的细胞壁、细胞膜和细胞质的形态和结构而达到抗真菌作用[4]。有研究发现，蒲公英提取物对金黄色葡萄球菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌和大肠埃希菌等均有不同程度的抑制作用[5]。还有学者发现，通过水提、醇提、超声提取法等分别提取出蒲公英多糖、黄酮和酚酸等，利用平板打孔法研究各活性成分对沙门菌、痢疾杆菌、大肠埃希菌、葡萄球菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果，结果显示不同提取方法对四种菌的抑制作用不同[6]。本文在蒲公英提取物对细菌抑菌作用的研究基础上，研究其对真菌的抑制作用，以白念珠菌为研究对象，从最低抑菌浓度(MIC)、扫描电镜(SEM)、抑菌动力学、细胞膜通透性和对细胞壁葡聚糖合成的影响五个方面，研究蒲公英提取物对白念珠菌的抑制作用及机制，旨在从植物中寻找抗真菌药物，为开发广谱、高效、低毒的抗真菌药物提供参考。

    1 材料

    1.1 菌株

    白念珠菌(Candida albicans，C.albicans，批号：ATCC10231，该菌株冻干菌种由陕西理工大学陕西省资源生物重点实验室菌种保藏中心提供)，-80℃低温冰箱冻存，实验前复苏传代使用。

    1.2 试药

    氢氧化钠、浓盐酸(37%)、无水乙醇、戊二醛、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、氯化钠、氯化钾(天津市富宇精细化工有限公司)；吐温80(Tween 80)、二甲基亚砜(DMSO)(天津市光复精细化工研究所)；氯霉素(上海瑞楚生物科技有限公司)；葡萄糖、蛋白胨、酵母浸粉、琼脂粉(北京奥博星生物技术有限责任公司)；溴化钾(PIKE，光谱纯，北京英莱克科技发展有限公司)；蒲公英全草(汉中市中药材市场，经陕西理工大学吴三桥教授鉴定为菊科植物蒲公英)。

    1.3 仪器

    紫外分光光度计UV250(日本岛津)；电热恒温培养箱DHP-9162(上海一恒科学仪器有限公司)；立式压力蒸汽灭菌锅LDZX-50KBS(上海申安医疗器械厂)；台式高速离心机TGL-20(湖南湘仪仪器开发有限公司)；超低温冰箱-80℃DW-86L338J(青岛海尔特种电冰柜有限公司)；超净工作台SW-CJ-1F(苏州净化有限公司)；低温冷冻干燥机SJIA-10N(宁波市双嘉仪器有限公司)；扫描电子显微镜JSM-6390LV(日本电子公司)；红外光谱仪FT-IR(美国Nicolette 公司)；真空干燥箱XMTD-8222(上海精宏实验设备有限公司) ......