郭峰，黄宁，，胡长平(.郑州大学第一附属医院药学部，郑州 450052；2.中南大学湘雅药学院药理学系，长沙 40078)

    外泌体(exosomes，Exos)是细胞膜向内凹陷形成包含管腔小体的多泡体，并通过与细胞膜融合释放到细胞外的异质性细胞外囊泡，异质性体现在其细胞起源、大小、内容物和对靶细胞的作用[1]。细胞膜向内凹陷时的不均一性导致了外泌体大小的异质性，通常认为外泌体是直径为40～160 nm 的膜性囊泡[1]。提取高纯度外泌体是外泌体相关研究的首要环节，而外泌体大小的异质性是导致提取外泌体纯度不足的主要原因。目前，常用的外泌体提取方法包括超高速差速离心法、试剂盒法、蔗糖密度梯度离心法和免疫磁珠捕获法等，其中超高速差速离心法和试剂盒法在基础性研究中应用最为广泛。本研究对比了超高速差速离心法和试剂盒法对外泌体的提取效果，以期为后续外泌体相关研究奠定基础。

    肺动脉高压(pulmonary hypertension，PH)是一种静息状态下平均肺动脉压力>20 mmHg，肺血管阻力≥3 Wood 单位的进行性疾病[2]。肺血管重构是PH 的典型病理特征，是引起肺血管压力和阻力升高的主要原因，其潜在机制尚未完全阐明[3]。肺动脉内皮细胞(pulmonary artery endothelial cells，PAECs)和肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells，PASMCs)在PH 肺血管重构中均发挥重要作用。PH 时，内膜损伤可致PAECs 发生内皮间质转化(endothelialmesenchymal transition，EndMT)，发生EndMT 后的PAECs 肿胀变大且失去紧密连接，增殖和促炎能力增强，最终导致内皮屏障破坏和内皮功能紊乱[4-5]；PASMCs 由收缩型转化为合成型，获得增殖、迁移、分泌活性物质和胞外基质等特点，从而促进中膜肥厚[6-7]。本课题组前期研究表明，PAECs-EndMT 和PASMCs 表型转化均可促进低氧PH 肺血管重构[8-9]。据文献报道，外泌体通过直接作用于肺血管细胞或介导肺血管细胞相互作用而参与PH 肺血管重构[10-14]。然而，外泌体是否通过调控PAECs-EndMT 和PASMCs 表型转化从而促进PH 肺血管重构，目前尚未见报道。本研究提取低氧PH 大鼠血浆源性外泌体并分别作用于PASMCs和PAECs，检测其对PASMCs 表型转化和PAECs-EndMT 的作用，以期进一步阐明PH 的发病机制，为PH 的防治提供参考和新思路 ......