基于UPLC-QTOF/MS的关黄母颗粒主要化学成分及脑组织移行成分研究
知母,黄柏,芍药,1材料,1仪器,2试药,2方法,1药液样品的制备,2对照品溶液的制备,3动物实验,4血浆及组织样品前处理,5色谱条件,6质谱条件,7数据处理,3结果,1药液化合物分析结
彭秘,张增珠,李刚,苏丹,熊国营,刘匡一*(. 中国人民解放军联勤保障部队第908医院,南昌 0000;. 江西中医药大学抑郁症中医证候动物模型江西省中医药管理局重点研究室,南昌 0000;. 南昌市第一医院,南昌 0000)女性更年期综合征(绝经前后诸证)中医辨证属肝肾阴虚证,症见烘热汗出、头晕、耳鸣、腰膝酸软或足跟痛、少寐多梦、急躁易怒等,关黄母颗粒在临床上常应用于妇女更年期后抑郁症类疾病的治疗,其主要成分包括熟地黄、龟甲胶、盐关黄柏、盐知母以及白芍。目前临床对抑郁治疗的药物多为化学类精神药品,普遍存在副作用大,成瘾性隐患等问题。近年来,愈来愈多的药学科研人员将目光转移至传统中药上来,以五味子、白芍、关黄柏等药材为主要代表。相对于关黄柏等单味药材,已有文献表明知母与关黄柏配伍联用可显著提高其小檗碱等生物碱的含量[1],而关黄母颗粒作为临床疗效确切的中药复方制剂,其具体联合用药抗抑郁作用机制尚不清晰,药物主要化学成分能否跨过血脑屏障直接调控神经系统成为传统中药治疗抑郁疾病的重要环节之一[2-3],因此,对其主要化学成分的分析及脑组织移行成分的研究显得极为重要。
本实验利用超高效液相色谱-质谱联用技术(UPLC-QTOF/MS)中的IDA采集技术[4-7],结合数据库及文献资料,解析药物中可能存在的主要化学成分,并鉴定大鼠灌胃给药后药物的入脑成分,为进一步明晰该药物抗抑郁作用物质基础提供实验依据[8],也为下一步的药物质量控制研究奠定基础。
1 材料
1.1 仪器
ExionLC AD超高效液相色谱系统、SCIEX X500R 四极杆飞行时间质谱仪(美国SCIEX);高速离心机(上海安亭科学仪器厂);涡旋混合器(海门市其林贝尔仪器制造有限公司);分析天平(梅特勒-托利多仪器有限公司);恒温氮气吹干仪(青岛海科仪器有限公司)。
1.2 试药
红景天苷(批号:B1619137,纯度≥97.5%,上海阿拉丁生化科技股份有限公司),槲皮苷(批号:111538-200301,纯度≥94.5%,中国食品药品检定研究院),益母草苷(批号:YA220607,纯度≥98%,合肥博美生物科技有限责任公司)。甲醇、乙腈(色谱级,Thermo Fisher公司),甲酸(质谱级,美国Sigma公司)。蒸馏水采用屈臣氏蒸馏水。关黄母颗粒(批号:04210503,通化万通药业股份有限公司,每袋装9 g,相当于饮片4.8 g)。
2 方法
2.1 药液样品的制备 ......
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