王超，付瑞嘉，左倩，徐顶巧，乐世俊，唐于平(陕西中医药大学 陕西省中医药管理局中药配伍重点研究室，西安 712046)

    急性肝脏损伤(acute liver injury，ALI)可由多种因素诱发，包括酒精、药物滥用、病毒感染、代谢和自身免疫攻击[1-2]。ALI发展末期会演变成肝纤维化或肝硬化，治疗难度高，治疗费用昂贵，故对肝脏疾病的早期防治十分重要。研究表明，肝损伤的病理过程中伴随着大量的炎症和氧化应激反应，抑制炎症以及缓解氧化应激反应对于治疗肝损伤具有重要意义[3]。因此，具有抗炎和抗氧化活性的药物可用于治疗肝损伤。蓍草来源于菊科植物蓍Achillea alpinaL.的干燥地上部分，具有解毒利湿、活血化瘀的功效[4]。现代研究表明，蓍草具有抗炎[5]、抗氧化、抗菌[6]的作用，能够显著改善高血压[7]、肝损伤[8]等疾病。蓍草治疗肝损伤的药效确切[9-10]，但是缺乏药效物质基础和作用机制的研究。网络药理学是基于系统生物学和药理学的综合性学科，通过分析生物网络和生物功能，从而系统化阐明药物分子作用机制。故本研究基于UPLC-Q-TOF/MS分析鉴定蓍草中含有的成分，然后利用网络药理学筛选预测这些成分作用的靶点并结合动物实验对网络药理学分析结果进行验证，进而初步探究蓍草防治ALI的药效及作用机制，以期为临床治疗ALI提供指导。

    1 材料

    1.1 动物

    SPF级SD雄性大鼠24只，体质量(200±20)g [成都达硕实验动物有限公司，合格证号SCXK(川)2020-030]，动物实验经陕西中医药大学伦理委员会批准，动物饲养和实验操作均符合实验管理条例要求。

    1.2 试药

    蓍草购自铜陵禾田中药饮片股份有限公司，药材经陕西中医药大学颜永刚教授鉴定为菊科植物蓍Achillea alpinaL.的干燥地上部分；联苯双酯滴丸(万邦德制药集团有限公司，规格：1.5 mg，批号：19J210318)。四氯化碳(CCl4，天津市天力化学试剂有限公司，批号：20210902)，橄榄油(上海源叶生物科技有限公司，批号：H29O11P129145)，LC-MS级甲醇(Honeywell Burdick & Jackson 公司)，LC-MS级甲酸(德国Darmstadt 默克公司)，分析纯甲醇(天津天利化学试剂有限公司)，二甲苯、正丁醇、无水乙醇(国药集团化学试剂有限公司)，柠檬酸抗原修复液、环保型脱蜡透明液、PBS缓冲液(武汉赛维尔科技有限公司)；谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)检测试剂盒(南京建成生物工程研究所)；BCA蛋白浓度测定试剂盒(上海碧云天生物技术有限公司)；大鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素6(IL-6)、IL-1β酶联免疫试剂盒(武汉伊莱瑞特生物科技股份有限公司)；一抗TLR-4、NF-κBp65、Nfr2、keap1、HO-1以及二抗辣根 HRP 标记山羊抗兔IgG 抗体(武汉赛维尔科技有限公司) ......