谭佳杰，向玉玲，熊远果，张洪(武汉大学人民医院药学部，武汉 430060)

    肝细胞癌(hepatocellular carcinoma，HCC)作为世界上最常见的癌症之一，常由包括慢性乙型和丙型肝炎病毒感染、过量饮酒、非酒精性脂肪肝在内的各种风险因素导致[1-2]。其常见的治疗方法包括手术切除、肝移植、局部消融和经导管动脉化疗栓塞术，其中晚期肝癌患者的临床疗效和预后非常差，迫切需要更有效的治疗药物[3-4]。

    克班宁(crebanine)作为一种阿朴啡类异喹啉生物碱，存在于防己科千金藤属(Stephania Lour)植物中，多来自其中的千金藤亚属(Subgen. Stephania)和山乌龟亚属(Subgen. Tuberiphania)[5]。研究发现，在云南地不容中，阿朴啡型和原小檗碱型生物碱最多，其中克班宁是含量最高的阿朴啡型化合物之一[6]。迄今为止，对于克班宁的性质结构已有了一定的探索结果[7-9]，且发现它具有抗心律失常等多种药理活性[10-13]。同时，已有多个研究证明克班宁能有效抑制白血病、纤维肉瘤、宫颈癌、乳腺癌、肺癌和卵巢癌等肿瘤细胞的活性[14-17]。Yodkeeree等[18]发现克班宁能通过下调侵袭迁移相关因子的表达来抑制肺癌的迁移和侵袭，另外Wongsirisin等[19]还发现克班宁作用于HL-60细胞后，能通过调控凋亡相关蛋白来介导细胞凋亡。

    但关于克班宁对肝癌的生物学影响，目前还未见更深入的报道，因此，本研究的目的在于探索克班宁对肝癌生物学方面的影响，从而为未来开发克班宁在肝癌方向的治疗作用提供一定的参考，并奠定相应的研究基础。

    1 材料

    1.1 试药

    克班宁(分子式：C20H21NO4，纯度≥ 98%，规格：20 mg，批号：RFS-K02811812016，成都瑞芬思生物科技有限公司，化学结构如图1)；DMEM高糖培养基(批号：8120360)、胎牛血清(批号：20012050)(美国Gibco公司)；CCK-8试剂盒(批号：C0038，上海碧云天生物技术有限公司)；Hoechst 33258染色试剂盒(批号：G1011)、PBS(批号：G4202)(武汉赛维尔生物科技有限公司)；Annexin V-FITC细胞凋亡试剂盒(批号：8086787，美国BD公司)；FoxO3a抗体(批号：10849-1-AP)、p-AKT抗体(批号：28731-1-AP)、p-FoxO3a抗体(批号：28755-1-AP)(武汉三鹰生物技术有限公司)；BAX抗体(批号：5023S)、Bcl-2抗体(批号：3498S)、PARP抗体(批号：9532S)、AKT抗体(批号：9272S)、β-actin抗体(批号：4970S)、二抗antirabbit IgG(H+L)(批号：5151S)(美国CST公司) ......