杨麒琳，马韫楠，杨万青，汪文杰，钟宛凌，樊箫雨，杨天姿，杜守颖，李鹏跃(北京中医药大学 中药学院，北京 100029)

    2020年版《中国药典》收录的地龙为钜蚓科动物参环毛蚓Pheretima aspergillum(E. Perrier)、通俗环毛蚓Pheretima vulgarisChen(P. vulgaris)、威廉环毛蚓Pheretima guillelmi(Michaelsen)或栉盲环毛蚓Pheretima pectiniferaMichaelsen 的干燥体[1]。前一种习称“广地龙”，主产地为广东、广西、海南等；后3种习称“沪地龙”，主产地为上海、江苏、浙江等[2]。我国地龙药材的基原动物主要有14个品种，分别属于钜蚓科(Megascolec-idae)、正蚓科(Lmubricidae)和链胃蚓科(Moniligastridae)5 个属[3]。赤子爱胜蚓Eisenia foetida(Savigny)为正蚓科爱胜蚓属，俗称红蚯蚓，其繁殖率高，适宜人工养殖，是目前世界上养殖最普遍的蚯蚓品种[4]。地龙及混淆品的基原动物种类繁多，且形态极其相似，容易造成品种混杂和掺假的现象[5]。通过 DNA 分子水平进行物种的鉴别是近年来兴起的物种鉴定新方法，在中药材鉴定领域中发挥重要作用。格小光等[6]采集全国多个药材市场的地龙，进行 DNA分子鉴定，与数据库比对，发现 55% 的市售地龙均非药典规定的基原。因此采用 DNA 分子鉴定地龙是有效的手段。

    现代研究表明，地龙中含有的化学成分主要有蛋白质、多肽、氨基酸、核苷、有机酸、脂质等[7]，其中地龙内含有的蛋白多肽类成分高达 55%～68%[8]。目前有关赤子爱胜蚓的研究大多集中在其对环境污染物的富集、生物降解等方面[9]。而赤子爱胜蚓不仅在环境保护方面发挥功能，同时也是一种有效的抗血栓药材。赤子爱胜蚓是药典地龙品种之外研究抗血栓活性较多的蚯蚓品种。20世纪 80年代日本学家 Mihara[10]首次从赤子爱胜蚓中分离得到具有纤溶酶活性的蛋白酶，后来研究者们开始研究蚯蚓具有抗血栓功效的蛋白多肽类成分，发现地龙蛋白中的纤维蛋白溶解酶、蚓激酶、蚓胶原酶对体内凝血系统具有显著的影响，是抗凝血活性物质的主要成分[11]。乙醇沉淀法是纯化蛋白常用方法，是利用蛋白的溶解度进行分离纯化，彭洪兵等[12]对比盐析法和水提醇沉法对地龙蛋白活性的影响，结果表明水提醇沉法的蛋白提取率及纤溶活性均高于盐析法。因此本实验选择药典内的沪地龙品种之一通俗环毛蚓和广地龙的品种参环毛蚓与药典外的赤子爱胜蚓，对比这3种蚯蚓水提液以及乙醇沉淀物的抗血栓活性大小 ......