许湘，黄丹，2，陆华冠，刘延涛，刘馨，谢新，2，雷昌，2，赵洪庆，2，刘建军，2*(.湖南中医药大学 科技创新中心，长沙 40208；2.中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地，长沙 40208；.中山大学附属医院第三医院超声科，广州 5060)

    肝纤维化常见于慢性肝病，可由多种致病因子引起，造成细胞外基质(extracellular matrix，ECM)大量沉积，纤维瘢痕替代正常组织。研究发现，缺氧和炎症是诱导肝纤维化形成最重要的因素，也是导致血管生成和血管重塑的原因，故血管生成在肝纤维化向肝硬化和肝癌进展中发挥重要作用[1]。目前，抗血管生成治疗已被证明可改善肝纤维化，降低门静脉高压，延长肝癌患者的总生存期[2-3]。在肝纤维化过程中，ECM主要由肌成纤维细胞产生，而肌成纤维细胞主要来源于活化的肝星状细胞[4]。且越来越多的研究发现，上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition，EMT)也是肌成纤维细胞来源之一，可能会促进肝纤维化的发生[5]。

    二十五味松石丸(Ershiwuwei Songshi pill，ESP)是藏区治疗肝脏疾病的经典方剂，具有清热解毒、疏肝利胆等功效，可用于治疗肝中毒、肝痛、肝硬化、腹水等疾病，收载于2020年版《中国药典》一部[6]。研究发现，二十五味松石丸在临床上具有治疗病毒性肝炎和肝硬化等疗效[7-8]。此外，二十五味松石丸也被证明在胆汁淤积性肝损伤[9]、非酒精性脂肪性肝炎[10]和药物性肝损伤[11]动物模型中具有肝保护作用，但较少人研究该药的抗肝纤维化作用[12]。目前关于二十五味松石丸如何发挥抗肝纤维化作用的机制尚不清楚。因此，本课题通过构建四氯化碳(CCl4)-酒精诱导的大鼠肝纤维化模型，探究二十五味松石丸防治肝纤维化的可能作用机制。

    1 材料

    1.1 动物

    SPF级雄性SD大鼠，6～8周龄，体质量(200±20)g [湖南斯莱克景达实验动物公司，单位使用许可证号：SYXK(湘)2019-0009，动物许可证号：SCXK(湘)2019-0004]，实验均符合动物伦理审查，伦理批准号：LL2022062803。所有动物均饲养于湖南中医药大学实验动物中心，温度(22±2)℃，湿度50%～55%，自由饮食饮水，黑暗和光照环境各12 h，适应性喂养7 d后开始实验。

    1.2 试药

    大鼠谷丙转氨酶(ALT，批号：2109R28)、大鼠谷草转氨酶(AST，批号：2109R30) ......