翟晓东，孙磊，吴德玲，许凤清(安徽中医药大学药学院 中药饮片制造新技术安徽省重点实验室，合肥 230012)

    牡丹皮Cortex Moutan始载于《神农本草经》，性微寒，味苦，辛，为清热凉血、活血化瘀之要药。安徽省铜陵市自晋代就有栽培牡丹的记载，距今已有1700多年的历史，其中凤凰山所出者因皮厚、木心小、香气足、疗效好享有道地药材之美誉。道地药材是植物基因组、植物外环境(土壤、气候、生物等因素)以及植物内环境(内生菌群、pH等)相互作用的产物[1]。内生真菌(endophytic fungi)是指生活在宿主植物组织中，与宿主植物共生时期对宿主植物组织没有引起明显病害症状并与宿主植物共生互惠的真菌[2]。其对宿主的促生长、抗逆性、促进活性物质生成和积累、吸附重金属等功能是道地药材形成的重要因子[3-4]。本实验前期对凤丹皮不同生长期内生真菌多样性研究中，分离并鉴定了9属13种内生真菌，并运用生物发酵工程研究分离纯化得到的Aspergillus sp. MBL1612、Fusarium oxysporum和Fusarium acutatum等菌株的次生代谢产物[5-8]。本文报道来源于凤丹皮中的一株优势菌株Alternaria arborescens，经液体发酵产生的麦角甾醇类成分的分离和结构鉴定工作。

    1 材料

    1.1 仪器与试药

    捷欧路JNM-ECP 600 MHz型核磁共振波谱仪(日本电子株式会社)；Agilent 1260 Infinity 2液相色谱系统(Agilent公司)；SW-CJ-2FD超净工作台(苏州净化设备有限公司)；万分之一电子天平(EL104型)；低温冰箱50 L(海信集团有限公司)；生化培养箱(上海一恒科学仪器有限公司)；YMC-Pack ODS-A色谱柱(粒径：5 μm，孔径：12 nm；250 mm×10.0 mm)；Sephadex LH-20(GE公司)；柱色谱硅胶(200～300目)、薄层色谱用硅胶板(GF254)(青岛海洋化工厂)；甲醇、乙腈(色谱纯，TEDIA公司)；其他试剂均为分析纯；水为纯净水(杭州娃哈哈集团有限公司)；显色剂为10%硫酸-乙醇溶液(105℃加热显色)。

    1.2 菌株来源及鉴定

    新鲜凤丹皮块根于2017年采集安徽省铜陵市凤凰山铁山村凤丹种植基地，经安徽中医药大学方成武教授鉴定为芍药科芍药属Paeonia ostiiT. Hong et J. X. Zhang的新鲜植株。按文献[9]进行分离纯化 ......