基于UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS技术分析经典名方身痛逐瘀汤化学成分
分子离子,纯度,1材料,1仪器与软件,2试药,2方法,1溶液的制备,2色谱条件,3质谱条件,3结果与分析,1黄酮类,2三萜皂苷类,3苯酞类,4香豆素类,5其他类成分
刘艳梅,刘金金,2,梁慧,彭致铖,朱德全,陈向东,孙冬梅*(. 广东一方制药有限公司,广东佛山 528244;2. 华南农业大学,广州 50642)身痛逐瘀汤由红花、桃仁、川芎、当归、羌活、秦艽、五灵脂、没药、香附、牛膝、地龙和甘草12味中药组成,具有活血行气、祛瘀通络、通痹止痛功效,处方中秦艽、羌活祛风除湿,桃仁、红花、当归、川芎活血祛瘀,没药、五灵脂、香附行血气,止疼痛,牛膝、地龙疏通经络以利关节,甘草调和诸药[1]。临床常用于治疗风湿关节痛、腰椎间盘突出、风湿腰腿痛等痹症[2]。常有军等[3]观察身痛逐瘀汤与非甾体抗炎药物均能减少大鼠变性腰椎间盘内肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素1α(IL-1α)、白介素6(IL-6)、基质金属蛋白酶3(MMP-3)的分泌,延缓腰椎间盘变性的进程,减少炎性因子分泌的作用优于非甾体抗炎药物。董昌盛等[4]建立大鼠Walker-256乳腺癌细胞骨癌痛模型,发现身痛逐瘀汤能够显著延长骨癌痛大鼠机械痛觉缩足阈值、热痛觉缩足潜伏期并减轻自发痛评分,对骨癌痛大鼠模型侧胫骨骨密度无明显影响。鉴于身痛逐瘀汤的临床疗效报道较多,针对其药效物质基础缺乏系统性研究,本研究采用UPLC-QExactive Orbitrap MS技术首次对身痛逐瘀汤基准样品进行全成分分析,建立整体和类群化学成分快速筛选鉴定方法,结合对照品及相关文献,快速分析鉴定未知成分,并对各成分进行药味归属,以期明确经典名方身痛逐瘀汤的药效物质基础,为其质量控制指标的选择提供科学依据。
1 材料
1.1 仪器与软件
UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱仪、Ultimate 3000 超高效液相色谱系统,含Xcalibar 4.1工作站、Thermo Scientific mzVault 2.0数据库软件(美国赛默飞世尔科技公司);QI数据处理软件(美国沃特世公司);XP26型百万分之一天平、ME204E十万分之一天平(梅特勒-托利多公司);KQ-3000E超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);Direct-Q5型超纯水机(美国Millipore公司)。
1.2 试药
色谱级甲醇、乙腈(德国Merck公司);HPLC级甲酸(美国 Thermo-fisher 公司);水(广州屈臣氏食品饮料有限公司)。
对照品α-香附酮(批号:110748-202117,纯度≥99.8%)、槲皮素(批号:100081-201610 ......
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