黄芪多糖对急性放射性肠炎大鼠肠黏膜细胞凋亡及TXNIP/NLRP3轴的影响
炎性,试剂盒,通路,1材料,1实验动物,2试药,2方法,1造模及分组,2疾病活动指数评分,3标本收集,4HE染色,5ELISA法检测各组大鼠肠黏膜中IL-6,TNF-α的含量,6TUN
李浩田,李鹏,王玉凤,张春礼(.郑州市第九人民医院普外科,郑州 450053;2.河南中医药大学人民医院/郑州人民医院普外二科,郑州 450053)近年来,肿瘤放射治疗已达成临床共识,且其治疗逐渐规范。然而,随着肿瘤发病率的增加和放射治疗的普及,越来越多的患者在接受盆腔和腹部恶性肿瘤的放射治疗后不可避免地发生急性放射性肠炎(acute radiation enteritis,ARE)[1]。ARE已成为腹部和盆腔恶性肿瘤放射性治疗之后常见的肠道并发症[2]。研究显示,电离辐射可导致肠组织内凋亡相关蛋白表达,进而诱导肠黏膜细胞凋亡,是ARE形成的重要机制[3]。黄芪多糖(astragalus polysaccharide,APS)是从中药黄芪中提取的主要活性成分之一,有研究表明APS可有效治疗三硝基苯磺酸诱导的小鼠结肠炎[4],提示APS在肠炎中发挥着保护作用。但目前关于APS治疗ARE的研究鲜有报道。硫氧还蛋白互作蛋白(thioredoxin interacting protein,TXNIP)/炎性小体3(NLR family pyrin domain containing 3,NLRP3)通路的激活与溃疡性结肠炎肠道炎症有关[5],但APS对ARE大鼠肠黏膜细胞凋亡及TXNIP/NLRP3轴的影响尚不清楚,因此,本研究拟构建ARE大鼠模型,以探究APS对ARE大鼠肠黏膜细胞凋亡及TXNIP/NLRP3轴的影响。
1 材料
1.1 实验动物
72只体质量为(200~250)g的健康雄性SD大鼠,购自广州赛业百沐生物科技有限公司[生产许可证号:SCXK(粤)2020-0055]。所有大鼠均在无特定病原体的环境下饲养,并在实验前一周提供自由饮水和饮食。大鼠被饲养在温度为(25±2)℃,光照/黑暗周期为12 h的环境中。该动物研究得到郑州市第九人民医院动物伦理委员会的批准(批准号:20200019),所有动物实验均遵循3R原则。
1.2 试药
APS(纯度:98%,批号:20211223,上海吉至生化科技有限公司);柳氮磺吡啶肠溶片(批号:20220102,上海信谊天平药业有限公司);白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)ELISA检测试剂盒(武汉赛培生物科技有限公司);TUNEL检测试剂盒、ECL发光检测试剂盒、BCA试剂盒(上海碧云天生物技术有限公司);Bax、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)、TXNIP、NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18、GAPDH兔多克隆抗体及辣根过氧化物酶(HRP)偶联的羊抗兔IgG二抗(广州易锦生物技术有限公司);JY04S-3C型凝胶成像分析系统(西安明克斯检测设备有限公司) ......
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