陆东裕，赵燕琳，金鹏，王倩，杜岩，汤道权*(.徐州医科大学附属医院睢宁分院药剂科，江苏 睢宁 00；.徐州医科大学江苏省新药研究与临床药学重点实验室，江苏 徐州 004)

    近年来，随着人们饮食及生活方式的改变，糖尿病的发病率逐年升高。据国际糖尿病联盟统计，2021年全球约有5.37亿人患有糖尿病，预计到2030年患糖尿病人数将增长到6.43亿。2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus，T2DM)占糖尿病患者总数的90%以上，致病因素包括肥胖、缺乏锻炼、高能量饮食和遗传因素等，同时会引发心血管疾病、糖尿病肾病、糖尿病足、视网膜病变等一系列并发症，给患者及其家庭带来了巨大的压力，给社会造成了极大的经济负担。

    二甲双胍(metformin，MET)为临床上用于治疗糖尿病的主要口服降糖药物，其主要通过减少肝脏葡萄糖的输出和改善外周胰岛素抵抗而降低血糖，是T2DM患者控制高血糖的一线用药和药物联合中的基本用药。长期服用MET可引起胃肠道反应、维生素B12水平下降及药物抵抗，其对脂质代谢紊乱及炎症的治疗作用也有待确认，且无法阻止并发症的发生。因此，MET与中药联合对T2DM及其并发症的延缓或阻滞作用，已引起广泛的注意。

    桑叶是桑科植物桑的干燥叶，具有疏散风热、清肺润燥、清肝明目的功效。《本草纲目》中首次记载了桑叶茶可用于“消渴症”的治疗。现代药理学研究同样证实，桑叶可改善链脲佐菌素(streptozotocin，STZ)及高脂饮食诱导的糖尿病大鼠及小鼠体内的血糖水平异常；降低糖尿病患者的血糖水平、改善其糖脂代谢异常[1-3]。

    研究证实，桑叶茶和MET联用可有效改善肺热津伤证T2DM患者中医证候评分及胰岛素抵抗，抑制白细胞介素-6(interleukin-6，IL-6)水平，该联合用药效果可能与桑叶能延迟MET的体内消除时间有关[4]。大量研究表明，糖尿病与肠道菌群的种类与数量存在一定的关系[5]。因此，本文在前期实验的基础上，以STZ联合高脂高糖(high fat and high sucrose，HFHS)饮食诱导的T2DM小鼠为对象，观察桑叶水提物(mulberry leaf water extract，MLE)联合MET对T2DM小鼠糖脂代谢、炎症及肠道菌群的影响，以期从肠道微环境的角度揭示桑叶联合MET改善T2DM的作用机制，并为临床上两者联合应用治疗T2DM提供实验依据。

    1 仪器与材料

    1.1 试药

    桑叶购自徐州广济连锁药店有限公司，经徐州医科大学季帅副教授鉴定为桑科植物桑(Morus albaL.)的干燥叶；MLE为本实验室自制[1]；MET(纯度≥ 98.5%；批号：A-32611906092)(江苏万邦生化医药股份有限公司)；STZ(纯度≥98%；批号：WXBD1402V)(美国Sigma公司)；Trizol总RNA提取试剂、PrimeScript RT Master Mix及TB Green Premix Ex Taq Ⅱ试剂盒(日本Takara公司)；鼠源IL-6、IL-1β、IL-10、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及β-actin上下游引物(上海生工生物工程股份有限公司)；三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、谷丙转氨酶(ALT)及谷草转氨酶(AST)试剂盒(南京建成生物工程研究所)；胰岛素、C-肽、脂多糖(LPS)试剂盒(上海岚派有限公司)；粪便DNA分离及纯化试剂盒、DEAE琼脂糖凝胶(德国默克公司)；高保真热启动酶试剂盒(美国KAPA Biosystems公司)；Ultra DNA Library Prep Kit for Illumina(英国New England Biolabs公司)；其他试剂均为分析纯 ......