李博，雷琨，刘家邑，刘军锋*，张珍(.陕西省中医医院，西安 7000；2.陕西中医药大学陕西省中药资源产业化协同创新中心，陕西 咸阳 72046；.北京中医药大学临床医学院，北京 00029)

    食管癌(esophageal cancer，EC)是消化系统中常见的恶性肿瘤，主要类型为食管鳞状细胞癌和食管腺癌。据统计，2020年全世界有超过54万人死于食管癌。食管癌发病隐匿，大多数患者发现时已处于中晚期，然而治疗效果相对有限，5年生存率仅20%[1-2]。因此，亟需寻找有效治疗食管癌的药物。

    金星散方源于著名中医肿瘤专家贾堃的效验方，由郁金20 g、白矾20 g、火硝20 g、重楼20 g、蟾酥3 g、红硇砂6 g、鸡子壳30 g、料姜石30 g、天南星30 g组成，可攻坚破积、利气止痛、养血健胃、强心滋补、扶正祛邪，增强机体抗病能力，使肿瘤细胞退变、体积缩小以至消失[3-5]。但其是否具有抗食管癌的作用，并不清楚。本研究应用人食管癌ECA-109细胞，探究金星散水提液抗人食管癌的作用及其机制。

    1 材料

    1.1 细胞

    人食管癌ECA-109细胞(广州吉妮欧生物科技有限公司)。

    1.2 试药

    CCK-8检测试剂盒(货号：BS350A，兰杰柯科技有限公司)；Hoechst 33342染料(货号：C1028)、流式细胞术凋亡检测试剂盒(货号：C1062M)(碧云天生物公司)；流式细胞术周期试剂盒(货号：WLA010a，万类生物科技有限公司)；ROS/Superoxide检测试剂盒(货号：ENZ-51010，美国Enzo Life Sciences 公司)；Caspase-3(货号：9662，美国Cell Signaling Technology公司)；Nrf2(货号：ab137550，Abcam公司)；山羊抗兔二抗、山羊抗鼠二抗(HRP标记，武汉三鹰生物技术有限公司)；金星散全部药材由陕西省中医医院药房提供。

    1.3 仪器

    SW CJ-2FD型超净工作台(江苏苏净集团有限公司)；IX73 倒置荧光显微镜(日本奥林巴斯)；311型细胞培养箱、Thermo Multiskan GO多功能酶标仪(美国Thermo公司)；流式细胞仪(美国BD公司)；Western blot曝光仪器Chemi Doc XRS+(美国Bio-Rad公司)。

    2 方法

    2.1 细胞培养

    ECA-109细胞置于含10%血清的1640培养基中(含双抗) ......