壮药火索藤汤剂指纹图谱的建立及含量测定研究
槲皮苷,桃苷,金丝,1材料,1仪器,2试药,2方法与结果,1色谱条件,2混合对照品溶液的配制,3供试品溶液的制备,4火索藤汤剂HPLC指纹图谱建立,5相似度评价,6聚类分析,7主成分分析,8OPLS-DA,9壮药火索
罗鑫,陈彦洁,蒋学青,苏芳林,王志萍*,谢谭芳*,陈豪(.广西中医药大学,南宁 530200;2.广西高校中药制剂共性技术研发重点实验室,南宁 530200)火索藤(BauhiniaaureaLevl.)亦称为牛蹄藤[1-3]、金毛羊蹄甲[4]、金叶羊蹄甲[5]、红绒毛羊蹄甲[6]、合掌风、黄麻藤、红毛藤,为豆科植物金毛羊蹄甲的根或茎,分布于广西、四川、贵州、云南等地。作为壮族民间用药的一种,其叶、藤和根均可供药用,化学成分复杂多样,主要有黄酮类、甾体类、芳香酸类等化合物,具有补肾涩精、祛风湿、活血止痛等作用[7-9]。由于火索藤药材基原地分布不均、药效成分和量效关系相关研究较少、《中国药典》历版无其收录等原因,目前学界尚未对火索藤进行系统研究。
近年来国内外围绕中药汤剂进行了大量研究,为火索藤标准汤剂及后续中药配方颗粒的标准制订提供了可借鉴的研究思路[10-24],其中通过HPLC指纹图谱结合化学计量分析是目前较为成熟且可行的研究路径。
本研究在前期研究基础上建立壮药火索藤汤剂样品的HPLC指纹图谱,结合聚类分析(CA)、主成分分析(PCA)、正交偏最小乘法-判别分析(OPLS-DA)等对各批次汤剂进行评价,并对金丝桃苷、槲皮苷进行含量测定,明确不同批次汤剂之间的含量差异,为其制剂的开发和研究提供参考。
1 材料
1.1 仪器
LC-2030C高效液相色谱仪(岛津公司);SHB-B95型循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司);QUINTIX125D-1CN型十万分之一电子天平(德国赛多利斯);YTLG-10冷冻干燥机(上海叶拓科技有限公司);PL-FS40T康士洁超声波清洗机(东莞康士洁超声波科技有限公司)。
1.2 试药
磷酸[色谱纯,阿拉丁试剂(上海)有限公司];甲醇、乙腈(色谱纯,美国 Fisher 公司);甲醇、乙醇(分析纯,成都市科隆化学品有限公司)。
金丝桃苷对照品(纯度:98.4%,批号:MUST-22071210)、槲皮苷对照品(纯度:98.6%,批号:MUST-22112917)(成都曼思特生物科技有限公司)。10批火索藤药材分别从广西壮族自治区北流市、梧州市、南宁市等地采购所得,药材经广西中医药大学韦松基教授鉴定为豆科植物火索藤BauhiniaaureaLevl.的藤茎和叶,药材产地信息见表1。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱:Waters XBridge C18(250 mm×4.6 mm ......
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