泥螺多肽酶解工艺的研究(1)
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【中图分类号】 R285.5 【文献标识码】A【文章编号】1672-3783(2011)04-0337-01
【摘要】 本文采用胰蛋白酶水解海洋生物泥螺的软体组织,进行多肽的制备工艺分析研究,以期获得较纯的多肽。本文以泥螺多肽酶解度为指标,通过L16(45)正交实验和酶解条件优化实验确定多肽的最佳酶解工艺。结果表明:胰蛋白酶酶解泥螺蛋白制备多肽的最佳酶解条件为:温度45℃、料液比1:4、pH 8.7、酶解时间8h、加酶量0.48%。
【关键词】 泥螺多肽;胰蛋白酶;酶解工艺
抗菌活性肽是生物界中广泛存在的一类生物活性小肽[1-3],是生物体固有免疫的关键因子之一。泥螺(Bullacta exarata),俗称"吐铁"、"黄泥螺"、"梅螺"等[4],隶属于腹足类后鳃亚纲软体动物,由贝壳和软体两部分组成,为西太平洋沿岸半咸水滩涂的习见种类,广泛分布于我国南北沿海潮间带滩涂,是典型潮间带底栖匍匐动物,多栖息在中底潮带,泥沙或沙泥的滩涂上,在风浪小、潮流缓慢的海湾中尤其密集,以东海和黄海产量最多。
海洋生物多肽是目前海洋生物活性物质研究的一个重要领域。舟山群岛素以"渔盐之利、舟楫之便"而扬名于世。泥螺遍布于舟山各港湾海涂,尤其以普陀朱家尖、定海长白泥螺为最,年产量在1.5万吨左右。目前采用胰蛋白酶从泥螺中提取多肽在国内外尚未见报道。本文首次就胰蛋白酶酶解泥螺制备多肽,并对其工艺条件进行了研究,以期获得可行性的泥螺多肽研究制备工艺方法,为今后酶解法对软体动物多肽的深入研究和开发利用提供科学依据,并极可能为水产养殖业的病害防治,食品加工中防腐剂的研究,畜禽业饲料添加剂研究等领域提供科学的借鉴具有重要意义。
1 仪器与材料
1.1 材料:泥螺采集自舟山马目泥螺养殖场;超滤膜为上海摩速科学器材有限公司产品,福林酚试剂为上海如吉生物发展有限公司产品,胰蛋白酶等试剂均为国药集团化学试剂有限公司分析纯。
1.2 主要仪器与设备 :高速组织捣碎机(DS-1上海标本模型厂);电子分析天平(BS110 北京赛多利斯天平有限公司);精密pH计(PHS-250 上海精密科学仪器有限公司);恒温水浴锅(SSW-420-2S 上海一恒科学仪器有限公司);冷冻干燥机(LGJ-18 北京松源华兴科技发展有限公司);高速冷冻离心机 (CF16RXⅡ 日本日立);紫外可见分光光度计(752FC上海光谱仪器有限公司);旋转蒸发仪(RE-2000A 上海亚荣生化仪器厂) ......
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