单克隆抗体用于血吸虫病诊断研究进展综述(2)
张素娥等人[23]用抗虫卵抗原的单克隆抗体MGZ为标记抗体的双抗体夹心EUSA检测血吸虫循环抗原，结果对慢性血吸虫病的阳性检出率为95.4%(83/87)，检测正常人血清222份，其中n例假阳性(5.00/0)；检测血吸虫病中度流行区人群622名和低流行区人群1099名，阳性率分别为22.5%和4.6%。对血吸虫病疗效进行评价的结果表明，治疗后3月循环抗原阴转率为54.2%、6个月为70.0%、1年为97.7%，可见这检测系统能较好区分过去感染和现症感染。
Hassan[21]等人以单克隆抗体128C3/3/21建立的捕获抗原一ELISA来检测35位现症埃及血吸虫病病人的循环抗原，结果其阳性率为100%，敏感性为100%、特异性>95%，经吡喹酮治疗后血液中循环抗原的含量剧烈下降，但治疗后依然有16位病人呈阳性。由此说明此单克隆抗体128C3/3/2l具有较高的敏感性和特异性，并且方法简便、快速。
陈红根等[22]制备TM5.28抗日本血吸虫肠相关抗原单克隆抗体，建立单抗一生物素一链霉亲和素检测系统，对各类血清进行检测。结果检测系统对慢性血吸虫病人和正常人检测的敏感性和特异性分别为83.1%和94.0%，该系统对血吸虫病人检测显示了较高的诊断效能。
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陶如华等[23]用单克隆抗独特型抗体NP30作为抗原，进行ELISA检测日本血吸虫血清抗体，与用肠相关抗原GAA和可溶性虫卵抗原SEA对照，检测100份急性病人血清，NP30检出率为95%；GAA为92%；SEA为97%，三者无显著差别。实验结果提示：NP30可望替代虫源性抗原，用于血吸虫病诊断。
单克隆抗体技术的应用极大地提高了检测循环抗原的灵敏度，迄今已筛选出数株具有体内、外高保护和特异性的单抗，但敏感性差异较大，重症和急性感染的敏感性高，轻度和慢性感染的敏感性偏低。今后仍然要在血吸虫病诊断抗原及其单克隆抗体、其他相关诊断试剂和免疫诊断程序的规范化、标准化等方面继续探讨。
参考文献
[1] 娄文娴，关耕耘，张恩英.单克隆体夹心ELISA定量检测日本血吸虫循环抗原[J].上海第二医科大学学报，1999，19(3) ：220
, 百拇医药
[2]严自助，王 文，吕再婴，等.单克隆抗体Dot-ELISA检测血吸虫病循环抗原的研究.中国寄生虫学与寄生虫病杂志，1990，8(3)：167~169
[3] 郑南才，蒋作君，徐 镜，等.单克隆抗体检测血吸虫卵循环抗原的研究医科大学学报[J]，1997，32(1)：81-82
[4] 娄文娴，盛 婪，杨士静，等.9种抗日本血吸虫单克隆抗体特性鉴定及其组合试验研究[J].中国血吸虫病防治杂志，1995，7(3)：141-143
[5] 娄文娴，张恩英，俞安洲，等.日本血吸虫感染中循环抗原动态变化及其机制研究.中国寄生虫学与寄生虫病杂志，1996，14(1)：5~10
[6] 娄文娴，吴琛耘，张恩英，等.单克隆抗体夹心ELISA定量检测日本血吸虫循环抗原[J].上海第二医科大学学报，1999，19(3)：220-222
, 百拇医药
[7] 朱荫昌，管晓虹，杨小红，等.抗rSjCTPI单克隆抗体检测血吸虫循环抗原的研究[J].中国寄生虫病防治杂志，2000，13(4)：285-287
[8] 裘丽姝，冯 正，张永红，等.多克隆与单克隆抗体夹心ELISA法检测日本血吸虫病患者血清循环抗原[J].中国寄生虫学与寄生虫病杂志，2000，18(2)：92-93
[9] Chen DX， He A， Zhan XM，et al.Schistosoma japonicum:construction of phage display antibody library and its applica-tion in the immunodiagnosis of infection[J]. Chin Med J，2004，117(11)：1697-1703
[10] 张恩英，吴深耘.应用斑点金免疫渗滤法诊断日本血吸虫病[J].中国血吸虫病防治杂志，1998，16(6)：454-456
, 百拇医药
[11] Deeler A M，De Jong N， Boermun O C，et al. Sensitive determination of circulating anodic antigen(CAA) inSchistosoma mansoniinfected individuals by enzyme-linked immunosorbent assay using mono-clonal antibodies.Am J Trop Med Hyg，1989，40：268~272
[12] De Jonge N，Boerman O C，Deeler A M. Time-resolved immunofluorescence assay(TR-IFMA) for the detection of the schistosome circulating anodic antigen.Trans R Soc Trop Med Hyg，1989a，83：659~663
, 百拇医药
[13] De Jonge N，Deeler A M，Boermun O C，et al. Detection of the schistosome circulating cathodic antigen(CCA) by enzyme immunoassay using biotinylated monoclonal antibodies.Trans R Soc Trop Med Hyg，1990，84：815~818
[14] Fu C.Detection of a circulating antigen in human schistosomiasis japonica using a monoclonal antibody.Am J Trop Med Hyg，1990，42：347~351
[15] 李剑瑛，颜萧，曾小军，等. McAb-RIHA检测日本血吸虫循环抗原[J].中国血吸虫病防治杂志，2007， 19(2)：147-148
, 百拇医药
[16] 尹东，陈红，许雪萍，等.单克隆抗体JPG3双抗体夹心酶联免疫吸附试验用于血吸虫病疗效考核的探讨[J].中国人兽共患病杂志，2004，20(8)：726-678.
[17] 吴玉龙，张炜明，刘文琪.抗SEA 鸡卵黄抗体用于血吸虫循环抗原检测的初步研究[J]. 现代生物医学进展，2008，8(12)：2416-2418
[18] 曾小军，陈红根，谢曙英，等.血吸虫单抗夹心酶标法(S-ELISA)的建立及其检测循环抗原的实验研究[J]，江西医学检验，2005， 23(5)：402-404
[19] LiYL，Idris MA，Corachan M，et al. Circulating anti-gens in schistosomiasis：detection of 31/32 kDa pro-teins in sera from patients infected withSchistosoma japonicum，S.mansoni，S.haematobium，or S.interca-latum.Parasitol Res. 1996，82∶14
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[20] 张素娥，施晓华，汤益，等.多抗一单抗双抗体夹心ELISA检测血吸虫循环抗原的研究[J].中国血吸虫病防治杂志，1997，9(2)：814
[21] Hassan.MM，Medhat A，MakhloufMM，et al.Detection of circulat-ing antigens in patients with active schistosomahaematobium infec-tion[J].Am J Trop MedHyg，1998，59(2)：295一301
[22]陈红根，曾小军，葛军，等.单克隆抗体一生物素一亲和素系统诊断日本血吸虫病的研究[J]，中华预防医学杂志，2006，40(4)：244-247
[23] 陶如华，仇镇宁，吴宜琴，等.抗独特型抗体作为日本血吸虫病诊断抗原的研究中国人兽共患病杂志[J]，1996，12(6)：8-10
作者单位：246052 安庆医药高等专科学校, http://www.100md.com(杨林青)
Hassan[21]等人以单克隆抗体128C3/3/21建立的捕获抗原一ELISA来检测35位现症埃及血吸虫病病人的循环抗原，结果其阳性率为100%，敏感性为100%、特异性>95%，经吡喹酮治疗后血液中循环抗原的含量剧烈下降，但治疗后依然有16位病人呈阳性。由此说明此单克隆抗体128C3/3/2l具有较高的敏感性和特异性，并且方法简便、快速。
陈红根等[22]制备TM5.28抗日本血吸虫肠相关抗原单克隆抗体，建立单抗一生物素一链霉亲和素检测系统，对各类血清进行检测。结果检测系统对慢性血吸虫病人和正常人检测的敏感性和特异性分别为83.1%和94.0%，该系统对血吸虫病人检测显示了较高的诊断效能。
, 百拇医药
陶如华等[23]用单克隆抗独特型抗体NP30作为抗原，进行ELISA检测日本血吸虫血清抗体，与用肠相关抗原GAA和可溶性虫卵抗原SEA对照，检测100份急性病人血清，NP30检出率为95%；GAA为92%；SEA为97%，三者无显著差别。实验结果提示：NP30可望替代虫源性抗原，用于血吸虫病诊断。
单克隆抗体技术的应用极大地提高了检测循环抗原的灵敏度，迄今已筛选出数株具有体内、外高保护和特异性的单抗，但敏感性差异较大，重症和急性感染的敏感性高，轻度和慢性感染的敏感性偏低。今后仍然要在血吸虫病诊断抗原及其单克隆抗体、其他相关诊断试剂和免疫诊断程序的规范化、标准化等方面继续探讨。
参考文献
[1] 娄文娴，关耕耘，张恩英.单克隆体夹心ELISA定量检测日本血吸虫循环抗原[J].上海第二医科大学学报，1999，19(3) ：220
, 百拇医药
[2]严自助，王 文，吕再婴，等.单克隆抗体Dot-ELISA检测血吸虫病循环抗原的研究.中国寄生虫学与寄生虫病杂志，1990，8(3)：167~169
[3] 郑南才，蒋作君，徐 镜，等.单克隆抗体检测血吸虫卵循环抗原的研究医科大学学报[J]，1997，32(1)：81-82
[4] 娄文娴，盛 婪，杨士静，等.9种抗日本血吸虫单克隆抗体特性鉴定及其组合试验研究[J].中国血吸虫病防治杂志，1995，7(3)：141-143
[5] 娄文娴，张恩英，俞安洲，等.日本血吸虫感染中循环抗原动态变化及其机制研究.中国寄生虫学与寄生虫病杂志，1996，14(1)：5~10
[6] 娄文娴，吴琛耘，张恩英，等.单克隆抗体夹心ELISA定量检测日本血吸虫循环抗原[J].上海第二医科大学学报，1999，19(3)：220-222
, 百拇医药
[7] 朱荫昌，管晓虹，杨小红，等.抗rSjCTPI单克隆抗体检测血吸虫循环抗原的研究[J].中国寄生虫病防治杂志，2000，13(4)：285-287
[8] 裘丽姝，冯 正，张永红，等.多克隆与单克隆抗体夹心ELISA法检测日本血吸虫病患者血清循环抗原[J].中国寄生虫学与寄生虫病杂志，2000，18(2)：92-93
[9] Chen DX， He A， Zhan XM，et al.Schistosoma japonicum:construction of phage display antibody library and its applica-tion in the immunodiagnosis of infection[J]. Chin Med J，2004，117(11)：1697-1703
[10] 张恩英，吴深耘.应用斑点金免疫渗滤法诊断日本血吸虫病[J].中国血吸虫病防治杂志，1998，16(6)：454-456
, 百拇医药
[11] Deeler A M，De Jong N， Boermun O C，et al. Sensitive determination of circulating anodic antigen(CAA) inSchistosoma mansoniinfected individuals by enzyme-linked immunosorbent assay using mono-clonal antibodies.Am J Trop Med Hyg，1989，40：268~272
[12] De Jonge N，Boerman O C，Deeler A M. Time-resolved immunofluorescence assay(TR-IFMA) for the detection of the schistosome circulating anodic antigen.Trans R Soc Trop Med Hyg，1989a，83：659~663
, 百拇医药
[13] De Jonge N，Deeler A M，Boermun O C，et al. Detection of the schistosome circulating cathodic antigen(CCA) by enzyme immunoassay using biotinylated monoclonal antibodies.Trans R Soc Trop Med Hyg，1990，84：815~818
[14] Fu C.Detection of a circulating antigen in human schistosomiasis japonica using a monoclonal antibody.Am J Trop Med Hyg，1990，42：347~351
[15] 李剑瑛，颜萧，曾小军，等. McAb-RIHA检测日本血吸虫循环抗原[J].中国血吸虫病防治杂志，2007， 19(2)：147-148
, 百拇医药
[16] 尹东，陈红，许雪萍，等.单克隆抗体JPG3双抗体夹心酶联免疫吸附试验用于血吸虫病疗效考核的探讨[J].中国人兽共患病杂志，2004，20(8)：726-678.
[17] 吴玉龙，张炜明，刘文琪.抗SEA 鸡卵黄抗体用于血吸虫循环抗原检测的初步研究[J]. 现代生物医学进展，2008，8(12)：2416-2418
[18] 曾小军，陈红根，谢曙英，等.血吸虫单抗夹心酶标法(S-ELISA)的建立及其检测循环抗原的实验研究[J]，江西医学检验，2005， 23(5)：402-404
[19] LiYL，Idris MA，Corachan M，et al. Circulating anti-gens in schistosomiasis：detection of 31/32 kDa pro-teins in sera from patients infected withSchistosoma japonicum，S.mansoni，S.haematobium，or S.interca-latum.Parasitol Res. 1996，82∶14
, 百拇医药
[20] 张素娥，施晓华，汤益，等.多抗一单抗双抗体夹心ELISA检测血吸虫循环抗原的研究[J].中国血吸虫病防治杂志，1997，9(2)：814
[21] Hassan.MM，Medhat A，MakhloufMM，et al.Detection of circulat-ing antigens in patients with active schistosomahaematobium infec-tion[J].Am J Trop MedHyg，1998，59(2)：295一301
[22]陈红根，曾小军，葛军，等.单克隆抗体一生物素一亲和素系统诊断日本血吸虫病的研究[J]，中华预防医学杂志，2006，40(4)：244-247
[23] 陶如华，仇镇宁，吴宜琴，等.抗独特型抗体作为日本血吸虫病诊断抗原的研究中国人兽共患病杂志[J]，1996，12(6)：8-10
作者单位：246052 安庆医药高等专科学校, http://www.100md.com(杨林青)