1.6实验标本采集和制作过程

    采用过量的动物麻醉药物处死家兔，切取包含肌腱-骨隧道界面双膝关节标本，修整膝关节标本周围的软组织，膝关节肌腱-骨隧道界面连续性的胫骨、前交叉韧带、股骨组织得以保留。

    将18只(36膝)家兔ACL组织标本经HE染色和免疫组化染色后在光学显微镜下进行形态学观察。制备标本步骤如下：(1)脱水：用梯度酒精(分别为100%、95%、80%及70%乙醇)脱水，每次脱水时间为2小时。(2)透明：以二甲苯透明，每例标本处理2次，每次30分钟。(3)包埋：用实验用石蜡包埋标本，每例标本浸蜡2次，每次2小时。(4)切片：低温冰箱内标本冷冻变硬，修整，切片。(5)脱蜡脱苯：每例脱蜡2次，每次5分钟，再使用梯度酒精脱苯处理即 70%、80%、95%及100%乙醇梯度脱苯，最后用蒸馏水冲洗。(6)染色：盐酸乙醇分化30秒后用自来水冲洗10分钟，先用苏木素染色5分钟，蒸馏水冲洗2秒，除去多余的染色液。再用伊红染色液染色1分钟，为防止过染2分钟内需将切片，95%乙醇处理5秒，并用蒸馏水除去多余的染色液。(7)脱水封片：分别用无水乙醇和95%乙醇脱水2次 ......