ELISA二步法检测HBsAg的钩状现象及解决方案
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2013年3月15日
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冯新国 李新红 欧阳淑兰 株洲市三三一医院检验科;
【摘要】目的对现行的HBsAg检测方法酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)进行分析,发现其存在的缺陷及解决方案。方法用现行的ELISA二步法与自行改进ELISA二步法对160例HBeAg阳性样本的HBsAg进行检测。结果对160例HBeAg阳性样本的HBsAg检测分析,用现行ELISA二步法检测HBsAg有151例呈阳性,9例为阴性。9例HBsAg为阴性的样本中6例是因钩状效应引起的假阴性,3例HBsAg阴性样本经改进方法检测其仍然是阴性。结论现行的ELISA二步法检测HBsAg仍然存在钩状现象,可以通过对样本血清进行稀释、增加酶标志物用量或增加洗板步骤得到改善和避免。
【关键词】 酶联免疫吸附试验 乙肝病毒表面抗原 钩状现象
【分类号】R446.6
血筛四项ELISA两步法纳入2010年颁布的新药典,同时废除其他ELISA一步法。新药典强调ELISA两步法就是为了尽量避免ELISA一步法试剂盒钩状效应所致的假阴性问题[1-2],确保抗原抗体有足够充分的接触时间,强化痕量抗原(抗体)的检出效果,以保障血液制品的安全使用。但目前的HBsAg
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