—/—小鼠颈动脉粥样硬化斑块的影响> miR—155介导PI3K/Akt/mTOR自噬通路对(2)
—,—小鼠颈动脉粥样硬化斑块的影响'> miR—155介导PI3K,Akt,mTOR自噬通路对ApoE—,—小鼠颈动脉粥样硬化斑块的影响
1.2.3 血脂测定 4组小鼠喂养8周后，腹腔注射100 g/L的水合氯醛(3 mL/kg)将小鼠麻醉，股动脉取血后，3 000 r/min离心取上清，测定总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL)水平。1.2.4 组织切片的制作 每组随机选5只小鼠取右侧颈动脉套管附近血管(对照组取靠近主动脉弓处血管)约3 mm，生理盐水冲洗后浸泡在40 g/L甲醛溶液中，梯度乙醇脱水、浸蜡包埋、切片，苏木精-伊红(HE)染色，光镜下观察血管AS形成情况。
1.2.5 Western blot实验 每组随机选10只小鼠取其右侧颈总动脉用于提取蛋白，并用100 g/L的SDS-聚丙烯酰胺凝胶恒压电泳分离蛋白，随后转移蛋白至PVDF膜上，用含50 g/L脱脂奶粉的TBST室温封闭1 h。加入PI3K抗体(1∶1 000)、Akt抗体(1∶1 000)、p-Akt抗体(1∶1 000)、p-mTOR抗体(1∶1 000)、mTOR抗体(1∶1 000)、LC3抗体(1∶1 000)和GAPDH抗体(1∶100)4 ℃孵育过夜 ......
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