1.2.2 一般状况及生存状态观察 每日观察记录大鼠一般状况及生存状态[18-19]。

    1.2.3 苏木精-伊红(HE)染色观察胸主动脉病理形态 给药4周后，采用水合氯醛3 mL/kg腹腔注射麻醉大鼠，迅速开胸，分离胸主动脉，剪取0.5 cm升主动脉浸于40 g/L中性甲醛溶液中固定24 h以上，制作石蜡切片，行HE染色，于光学显微镜下观察胸主动脉病理改变，400倍镜下拍照[20]。

    1.2.4 ELISA法检测胸主动脉PROCR浓度 采用PROCR ELISA试剂盒测定胸主动脉组织上清液中的PROCR浓度，严格按照试剂盒说明书步骤进行操作。

    1.2.5 Western Blot法检测PI3K-p85、VEGFA蛋白表达及Akt、eNOS磷酸化水平 提取胸主动脉总蛋白，采用BCA法测定蛋白质浓度[21-22]；用SDS-PAGE凝胶电泳分离蛋白，在Bio-Rad系统中将分离到的蛋白转移至硝酸纤维素膜上；以50 g/L脱脂奶粉溶液室温封闭1.5 h，封闭过的膜加入一抗(1∶500)4 ℃孵育过夜，洗膜后再加入HRP标记的二抗(1∶5 000)室温孵育1 h ......