铁蛋白对MPP+诱导MES23.5细胞损伤的作用(2)
1.2MES23.5细胞培养在细胞培养之前,先应用100 mg/L的多聚赖氨酸处理细胞培养瓶,再用无菌三蒸水洗3次。將MES23.5细胞从液氮中复苏后用培养液悬浮,接种于预先铺有多聚赖氨酸的培养瓶中,置于37 ℃、含体积分数0.05 CO2的培养箱中。之后用加入血清的培养液每2~3 d传代1次。
1.3 MTT法筛选MPP+浓度
将MES23.5细胞以8×107/L的密度接种于96孔板,每孔100 μL,培养48 h后,弃上清,再分别加入终浓度为0、50、100、150、200、300 μmol/L的MPP+处理24 h。细胞处理结束后,每孔加入5 g/L的MTT 20 μL,培养4 h后取出培养板,弃上清,每孔加入100 μL的DMSO,震荡5 min。用酶标仪在波长570 nm处测各孔吸光度(A)值。
1.4 实验分组
在确定MPP+造模浓度的基础上 ......
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