尿酸对乳鼠心肌成纤维细胞胶原合成及炎性分泌影响(2)
1材料与方法1.1材料
1.1.1动物出生2~3 d的Wistar大鼠,雌雄不限,购自青岛大任富城畜牧有限公司。
1.1.2试剂尿酸(Sigma公司),DMEM培养液、2.5 g/L胰酶(含0.2 g/L EDTA)和胎牛血清(Hyclone公司),MTT试剂盒(Solarbio公司),羟脯氨酸试剂盒(南京建成科技有限公司),Lipofectamin 2000(Invitrogen公司),大鼠白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)酶联免疫吸附试验(ELISA)检测试剂盒(欣博盛公司),miR-155 inhibitor及其阴性对照、miRNA PCR试剂盒(广州锐博生物科技有限公司),总RNA试剂盒(美国Omega公司),逆转录试剂盒及荧光定量PCR试剂盒(天根生物公司),PCR引物由生工生物工程(上海)股份有限公司合成。
1.2CFs的分离培养
取10~15只出生 2~3 d的Wistar大鼠 ......
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