Cx43及其磷酸化蛋白在帕金森病细胞表达(2)
1.3实验仪器CO2培养箱购于Thermo Electron Corporation公司,倒置荧光显微镜购于Olympus公司,台式低温离心机(5417R)购于Eppendorf公司,電泳槽、电泳仪、电转仪(湿转)均购于BIO-RAD公司。
1.4过表达α-Syn的细胞模型制备
待培养瓶中细胞生长良好,将细胞以1×108/L的密度接种至6孔板中,待板中的细胞融合度达到70%~90%时进行转染。取5 μL LipotamineTM2000溶于150 μL Opti-MEM Ⅰ无血清培养基中,同时取2 μg含有绿色荧光标签质粒GV230-EGFP(对照组,A组)、GV230-EGFP-WT-α-Syn(WT α-Syn组,B组)、GV230-EGFP-A53T-α-Syn(A53T α-Syn组,C组)溶于150 μL Opti-MEM Ⅰ无血清培养基中,分别混匀后,室温静置5 min。将质粒和 LipotamineTM2000混合均匀 ......
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