PCR荧光探针法诊断急性白血病化疗后结核1例并文献复习(2)
急性白血病化疗后合并结核病,临床表现十分隐匿或不典型,常规结核病检测方法如痰涂片抗酸染色、T-SPOT很难出现阳性结果。本例病人行痰涂片抗酸染色、胸腔积液细菌培养、涂片病理、胸膜穿刺活检等检查均未找到肺结核感染的典型证据,最终行结核核酸PCR-荧光探针法检测结核杆菌核酸阳性,支持肺结核的诊断。荧光定量PCR(FQ-PCR)检测技术主要是利用PCR体外扩增法检测结核分支杆菌DNA,所使用的荧光化学物质包括荧光探针和荧光染料。FQ-PCR检测原理为TaqMan探针法,即在PCR扩增时加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光标记探针,该探针为一寡核苷酸,探针的5′端标以荧光发射基团羧基荧光素(FAM),3′端则标以荧光猝灭基团羧基四甲基罗丹明(TAMRA)。FQ-PCR过程中,利用Taq酶的5′-3′外切核酸酶活性释放荧光信号。因每扩增一条DNA,便释放一个荧光信号,根据荧光强弱可对PCR产物进行精确定量,体现了其准确性[12]。由于FQ-PCR采用密封系统,可避免PCR期间及PCR之后产物受到污染 ......
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