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编号:13524199
海洋多肽对血管内皮细胞氧化损伤保护作用及机制(3)
http://www.100md.com 2019年12月1日 《青岛大学学报(医学版)》 20196
     1.3.5 Western blot检测Caspase-3、P53、Bax及Bcl-2表达 采用RIPA缓冲液提取细胞总蛋白,以蛋白检测试剂盒定量上样浓度。将蛋白经100 g/L的SDS-PAGE凝胶电泳分离,转移至PVDF膜上,用含50 g/L脱脂牛奶的TBS-T缓冲液封闭膜后,加入一抗(稀释度Caspase-3为1∶200,P53为1∶300,Bax为1∶300,Bcl-2为1∶150)4 ℃孵育过夜,TBS-T洗3次后,进一步与辣根过氧化物酶结合的二抗孵育2 h,然后加ECL化学发光液,用Fluor Chem FC2 Alfaview凝胶成像仪(美国Alpha公司)

    检测各组蛋白的发光强度,随机软件分析各种蛋白的相对表达量。

    1.4 统计学分析

    应用SAS 9.2软件进行统计学分析,计量数据采用±s形式表示,多组数据间比较采用单因素方差分析,两两比较采用Dunnet t检验。P<0.05为差异有统计学意义。

    2 结 果

    2.1 各组HUVECs细胞增殖活性比较

    正常对照组、模型组、狭鳕鱼皮多肽低剂量组、狭鳕鱼皮多肽中剂量组、狭鳕鱼皮多肽高剂量组细胞增殖活性分别为(100.00±9.42)%、(63.70±5.71)%、(71.62±6.48)%、(84.10±8.33)%和(92.03±6.21)% ......
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