2 结 果

    2.1 最佳转染效率的筛选及表达时效的观察

    通过荧光电镜观察转染荧光强度及光镜下观察细胞形态与数目显示，MOI为100时转染组的转染效率最高，转染第6天时，转染效率可达到82.9%(图1);绿色荧光表达阳性细胞比例随细胞传代次数的增加，有逐渐减少趋势，但趋势不明显，至培养第90天时，绿色荧光蛋白表达阳性细胞比例约为69.5%。两对照组髓核细胞传到第5代时，生长速度变得缓慢，光镜下观察细胞突起延长，呈梭形，胞质逐渐减少，折光性较差;传至第6代时，细胞演变为长梭形，生长滞缓，并出现老化现象。而pLVX-hTERT转染组细胞传至第15代时，光镜下观察髓核细胞仍呈多角形、短梭形，细胞形态饱满、胞浆丰富，形态正常，细胞代谢旺盛，增殖能力较强，与未转染病毒的前3代髓核细胞形态无明显差异。截止到撰稿时建立的永生化髓核细胞系已传代25代，髓核细胞的形态与活性状态良好。

    2.2 各组hTERT基因表达水平

    RT-PCR检测结果显示，两对照组的目的基因不表达，而pLVX-hTERT转染组在转染后的第7、15、30、60、90天均可检测到hTERT基因表达 ......