1.3.8 NLRP3、ASC、caspase-1蛋白表达测定 采用蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测大鼠肺组织中NLRP3、ASC、caspase-1蛋白表达。将大鼠右肺下叶部分组织放入预冷研钵中研磨，然后加入组织细胞裂解液，于冰上静置30 min，离心(4 ℃，12 000 r/min)15 min，取上清。取总蛋白样品，加入5×上样缓冲液，95 ℃反应10 min后行SDS-PAGE电泳，PVDF膜湿转法转膜(电流130 mA，电压60 V)60 min;分别加入内参β-actin一抗(1∶5 000)，NLRP3一抗(1∶1 000)、ASC一抗(1∶1 000)、caspase-1一抗(1∶1 000)，4 ℃过夜，以1×TBST洗涤3次，每次10 min;加山羊抗兔二抗(1∶5 000)室温下孵育1 h，以1×TBST洗涤3次，每次10 min;采用IMAGE J软件(NIH公司，美国)扫描蛋白条带灰度值 ......