大肠癌发生过程中错配修复基因hMSH2、hMLH1表达的意义(2)
1 材料与方法
1.1研究对象
收集大连市多家医院1999年1月~2006年8月间未经放化疗的手术切除大肠癌标本 163例,患者男性 95例,女性 68例,年龄 27~88岁,平均 60.4岁;≤55岁组 44例、55~65岁组 39例、≥65岁组 80例;直肠 120例,结肠 43例;高-中分化癌 143例,低分化癌 20例;未达到浆膜层 55例,达到浆膜层 108例;无淋巴结转移 43例,有淋巴转移 120例。其中 40例取得癌旁黏膜组织,另取正常人大肠黏膜37例。
1.2试剂
鼠抗人hMSH2单克隆抗体与鼠抗人hMLH1单克隆抗体均购自美国Zymed公司。
1.3实验方法
标本经4%中性甲醛固定,常规石蜡包埋, 制成4μm 连续切片,行常规HE染色,选择细胞状态良好处,进行免疫组织化学染色,用已知染色阳性大肠癌细胞切片作阳性对照,PBS取代一抗作阴性对照。
1.4 结果判断
hMSH2、 hMLH1蛋白均以细胞核内出现棕黄色颗粒判为阳性表达,准计数5个高倍视野或500个细胞 ......
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